黃曲霉毒素B1（黃曲霉毒素 B1簡寫為AFB1）是二氫喃氧雜鄰的衍生物，含有一個雙呋喃環(huán)和一個氧雜萘鄰?fù)?a href="/hebeideji/3325594023881090665.html">香豆素）。
黃曲霉毒素B1是已知的物質(zhì)中致癌性最強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素B1對包括人和若干動物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。在天然食物中以黃曲霉毒素B1最為多見，危害性也最強(qiáng)，國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉毒素B1是大部分食品的必檢項目之一。
研究簡史
黃曲霉毒素（Aflatoxin，AF）最早被發(fā)現(xiàn)于1960年，是黃曲霉（Aspergillusflavus）和寄生曲霉（Aspergillusparasiticus）的次級代謝產(chǎn)物，種類繁多，目前已分離鑒定出12種以上，常見的有黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、B2a、G2a、BM2a和GM2a等，其中以黃曲霉毒素B1分布最廣、毒性最強(qiáng)、危害最大。黃曲霉毒素的熱穩(wěn)定性非常好，常規(guī)烹調(diào)和加熱法不易分解。
物化特性
黃曲霉毒素B1純品為無色結(jié)晶，相對分子量為312.27，難溶于水而易溶于油及多種極性有機(jī)溶劑，如三氯甲烷、甲醇、乙醇、丙醇、乙二甲基胺，不溶于石油醚、乙醚和己烷。一般在中性溶液中較穩(wěn)定，但在強(qiáng)酸性溶液中稍有分解在，在pH9-10的強(qiáng)堿溶液中分解迅速。黃曲霉毒素對光、熱、較穩(wěn)定，只有加熱到280—300℃才裂解，高壓滅菌2小時，毒力降低25%—33%，4小時降低50%。黃曲霉毒素B1在紫外線下發(fā)藍(lán)色熒光，且紫外線對低濃度黃曲霉毒素B1有一定的破壞性。
污染狀況
黃曲霉毒素B1存在于土壤，動植物各種堅果，特別是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調(diào)味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經(jīng)常發(fā)現(xiàn)黃曲霉毒素。一般以熱帶和亞熱帶等南方高溫、高濕地區(qū)受污染最為嚴(yán)重，食品中黃曲霉毒素的檢出率比較高。黃曲霉毒素耐熱，280℃才可裂解，故一般烹調(diào)加工溫度下難以破壞。
分布與代謝
黃曲霉毒素B1的代謝主要發(fā)生在肝臟，腎臟、脾臟和腎上腺也會有所分布，一般不會存在于肌肉中。黃曲霉毒素如不連續(xù)攝入，一般不在體內(nèi)積蓄。一次攝入后約1周即經(jīng)呼吸、尿、糞等將大部分排出。
黃曲霉毒素B1在沒有經(jīng)過代謝活化之前的母體化合物是無致癌性的，因此被稱為前致癌物，因為它必須通過體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化即“代謝激活或生物激活”形成活性中間體才具有致癌性。它在在動物體內(nèi)經(jīng)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的細(xì)胞色素P450混合功能氧化酶的作用下轉(zhuǎn)化發(fā)生脫甲基、羥化及環(huán)氧化反應(yīng)成黃曲霉毒素M1、黃曲霉毒素M2、黃曲霉毒素P1、黃曲霉毒素Q1、黃曲霉毒素B2α、黃曲霉毒素醇等物質(zhì)。黃曲霉毒素B1通過羥基化作用轉(zhuǎn)化成黃曲霉毒素M1（AFM1）。
黃曲霉毒素M1是黃曲霉毒素B1的代謝產(chǎn)物，不同動物以牛奶中的AFM1代謝物含量最高。
毒性
黃曲霉毒素B1的毒性要比嘔吐毒素的毒性強(qiáng)30倍，比玉米赤霉烯酮的毒性強(qiáng)20倍。黃曲霉毒素B1的急性毒性是氰化鉀的10倍，砒霜的68倍，慢性毒性可誘發(fā)癌變，致癌能力為N-亞硝基二甲胺的75倍，比二甲基偶氨苯高900倍，人的原發(fā)性肝癌也很可能與黃曲霉毒素有關(guān)。
人類
（1）大量攝入時，可發(fā)生急性中毒，出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細(xì)胞脂肪變性和膽管增生。
（2）微量持續(xù)攝入，可造成慢性中毒，生長障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。
（3）具有致癌性，可導(dǎo)致人類肝癌和食道癌（黃曲霉毒素）。
動物
家禽：（1）采食量，體增重和飼料轉(zhuǎn)化率降低；（2）不孕，流產(chǎn)；（3）肺水腫，（4）疫病易感性增加。
豬：（1）采食量，體增重和飼料轉(zhuǎn)化率降低；（2）不孕流產(chǎn)，（3）肺水腫，（4）疫病易感性增加。
奶牛：（1）采食量，產(chǎn)奶量，體增重和飼料轉(zhuǎn)化率降低；（2）繁殖性能紊亂，胚胎死亡和流產(chǎn)；（3）神經(jīng)系統(tǒng)紊亂，肌肉痙攣和缺乏協(xié)調(diào)性；（4）疫病易感性增加。
防范措施
1、工業(yè)飼料要控制好原料，把好飼料關(guān)。進(jìn)廠前要檢測B1和水份。飼料原料含水量不超過13%的原則進(jìn)行控制，對含水量超過標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)及時干燥后貯存，或者使用防霉劑。飼料的倉庫，除了應(yīng)保持通風(fēng)、陰涼、干燥外，地面要有實(shí)木板架撐隔。環(huán)境溫度高于10℃時，堆放高度不應(yīng)超過4米。
2、不能使用發(fā)霉飼料。四川省高溫潮濕，本地糧食容易發(fā)霉變質(zhì)，發(fā)霉后不能用作飼料。一些養(yǎng)殖戶喜歡使用沼渣直接作飼料，而且堆放時間長，容易發(fā)霉。飼喂奶牛的特別應(yīng)當(dāng)慎重。如果要用，應(yīng)當(dāng)當(dāng)天用完。青貯飼料，特別是玉米青貯飼料開窖后容易產(chǎn)生“二次發(fā)酵”產(chǎn)生霉菌毒素，應(yīng)當(dāng)特別關(guān)注。
3、吸附法吸附霉菌毒素：某些礦物質(zhì)如活性炭、蒙脫石、硼潤土、沸石等都有很強(qiáng)的吸附作用而且性質(zhì)穩(wěn)定，一般不溶于水，不易被動物吸收，添加到飼料中可減少畜禽對黃曲霉毒素的攝入。
4、酶解法分解霉菌毒素：飼料級酶制劑，具有專一，高效分解霉菌毒素的一類生物酶，包括：飼用黃曲霉毒素B1分解酶等酶。
5、預(yù)防霉變：農(nóng)作物一經(jīng)收獲，應(yīng)立即在日光下曝曬或用烘干機(jī)烘干，使其迅速干燥。谷物含水量<13%，玉米含水量<12.5%，花生<8%以下時，霉菌就不易生長繁殖。貯藏后也應(yīng)保持糧倉適合的溫度、濕度，必要時化學(xué)熏蒸防霉及Y射線照射。
6、去毒：人工挑選去除霉?fàn)€，主要適用于花生；大米可采用碾軋加工和加水搓洗；玉蜀黍?qū)?/a>可用碾磨水浮脫胚的方法，因毒素主要集中在胚部；食用油加鹽后經(jīng)高溫，去毒效果滿意。其它如紫外線照射、高溫處理法、鹽炒法都具一定效果。
7、嚴(yán)格執(zhí)行食品衛(wèi)生法規(guī)：對不符合衛(wèi)生法規(guī)要求的食物不得出售。我國食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定：玉米、花生油、花生及其制品中黃曲霉毒素不得>20微克/公斤；大米、其它食用油不得>10微克/公斤；其它糧食、豆類、發(fā)酵食品不得>5微克/公斤；嬰兒代乳食品不得檢出黃曲霉毒素。
檢測方法
GB2761-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌霉素的限量》中對于黃曲霉毒素B1的限量以及檢測方法做了修改，嬰幼兒配方食品及嬰幼兒輔助食品按照GB5009.24規(guī)定的方法測試，其他食品按照GB/T18979規(guī)定的方法測定。
薄層色譜法TLC
TLC法是測定黃曲霉毒素的經(jīng)典方法，是中國測定食品及飼料中AFT黃曲霉素B1(AFB1)的標(biāo)準(zhǔn)方法之一（GB/T5009.23-2006）。其原理是針對不同的樣品，用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來，經(jīng)溶劑萃取純化，再在薄層板上層析展開，分離，利用AFB1的熒光特性，根據(jù)熒光斑點(diǎn)的大小和強(qiáng)弱，比較測定黃曲霉毒素含量。
TLC有單項展開法和雙向展開法，TLC法由于設(shè)備簡單，易于普及，所以國內(nèi)外仍在使用，但由于該法樣品前處理繁瑣，且提取和凈化效果不夠理想，提取液中雜質(zhì)較多因而在展開時影響斑點(diǎn)的熒光強(qiáng)度，而雙向展開雖避免了雜質(zhì)干擾，增加了靈敏度，但增加了操作步驟和時間。
液相色譜法
高效液相色譜法對黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2分別進(jìn)行定量分析。其主要是用熒光檢測器檢測，在適宜的流動相條件下，采用反相C18柱，使多種黃曲霉毒素同時分離。黃曲霉毒素免疫親和柱HPLC法采用單克隆抗體免疫技術(shù)，可以特效地將黃曲霉毒素與其他真菌素分離出來，分離效率和回收率高。此方法已得到廣泛應(yīng)用，并被美國官方分析化學(xué)家協(xié)會（AOAC）確認(rèn)為官方檢測方法。該方法的檢測限可達(dá)0.02~5ppb。
酶聯(lián)免疫法ELISA
酶聯(lián)免疫法檢測AFB1的理論基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，其采用單克隆或多克隆抗體技術(shù)，具有特異性強(qiáng)、分析時間短等優(yōu)點(diǎn)。其原理是抗原（或抗體）吸附于載體上的免疫吸附劑和用酶標(biāo)抗體（或抗原）與標(biāo)本中的待測物（抗原或抗體）起特異的免疫學(xué)反應(yīng)，最后用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類：一是用雙抗體夾心法檢測樣本中的AFTB1，二是用競爭法檢測樣本中的AFTB1,。為了使用方便，目前國內(nèi)外已研制了酶標(biāo)記免疫吸附測定試劑盒及配套儀器，方法也被列入國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T5009.22，1996第二法)。
但由于ELISA法中酶的活性易受反應(yīng)條件影響，因此ELISA法測定結(jié)果穩(wěn)定性較差，分析結(jié)果的準(zhǔn)確性不高，容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法
一般來說，組織中黃曲霉毒素含量很低，而液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法具有比高效色譜法更高的靈敏度和準(zhǔn)確性，如今這種方法還極少使用在測定組織霉菌毒素含量中。該方法檢測限可達(dá)0.02~0.025ppb。84%甲醇水溶液提取樣品中，己烷脫脂,HLB固相萃取柱凈化。采用電噴霧電離，陽離子掃描，選擇多反應(yīng)檢測模式（MRM）監(jiān)測，外標(biāo)法定量，該法靈敏，結(jié)果可靠。
衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
中國食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了幾種主要易受污染的食物中黃曲霉毒素B1的允許量標(biāo)準(zhǔn)，玉米、花生、花生油中黃曲霉毒素B1允許量為≤20μg/kg。而歐盟等國于2002年對糧食，花生及其產(chǎn)品中的AFTB1含量進(jìn)行的修訂規(guī)定，人類直接使用的花生中AFTB1含量需≤2μg/kg，作為食品原料進(jìn)口的花生AFTB1含量需≤8μg/kg。
污染事件
2015年11月16日，廣西壯族自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局通報了對80批次食品進(jìn)行抽檢的信息。其中合格產(chǎn)品76批次，不合格產(chǎn)品4批次，不合格產(chǎn)品全部為花生油產(chǎn)品，不合格原因為黃曲霉毒素B1超標(biāo)。
其中，不合格產(chǎn)品為廣西貴港市覃塘區(qū)好純香食用油廠、玉林市大鍵食品有限責(zé)任公司、廣西貴港市覃塘區(qū)益昌油房生產(chǎn)的散裝花生油和廣西浦生糧油食品有限公司生產(chǎn)的5L瓶裝壓榨一級花生油。同時，廣西貴港市覃塘區(qū)益昌油房生產(chǎn)的散裝花生油黃曲霉毒素B1超標(biāo)10倍。
專家分析，造成花生油產(chǎn)品中黃曲霉毒素B1超標(biāo)的主要原因是花生原料在種植、采收、運(yùn)輸及儲存過程中受到黃曲霉等霉菌污染，或企業(yè)在生產(chǎn)時沒有嚴(yán)格挑揀花生原料和進(jìn)行相關(guān)檢測，沒有采用精煉工藝或工藝控制不當(dāng)。
參考資料 >