《分子生物學(xué)實驗技術(shù)》是一本于2008年1月1日由化學(xué)工業(yè)出版社出版的圖書,作者為屈伸和劉志國。
內(nèi)容簡介
作為一本實驗技術(shù)類專著,本書不僅較詳細(xì)地闡述了有關(guān)技術(shù)的具體操作和程序,更著力于對各種技術(shù)的基本原理及其相關(guān)理論基礎(chǔ)進(jìn)行深層次的剖析。
故本書不僅可作為從事生命科學(xué),特別是分子生物學(xué)相關(guān)領(lǐng)域工作者的實驗室必備參考工具書,同時也可供高校相關(guān)專業(yè)師生及科學(xué)工作者對分子生物學(xué)實驗技術(shù)的理論做深入探討時參考。
編輯推薦
本書是關(guān)于分子生物學(xué)實驗技術(shù)的一部綜合性著作。它全面覆蓋了有關(guān)分子生物學(xué)實驗技術(shù)的諸多領(lǐng)域,包含了生物大分子制備和分析常用技術(shù)、蛋白質(zhì)與核酸的提取與分離、PCR技術(shù)、分子雜交與印跡技術(shù)、分子克隆技術(shù)、外源基因轉(zhuǎn)移技術(shù)、蛋白質(zhì)表達(dá)技術(shù)、分子標(biāo)記技術(shù)、分子改造技術(shù)、測序及人工合成技術(shù)、基因組學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)、生物芯片技術(shù)、生物信息學(xué)技術(shù)、RNA研究技術(shù)等。
目錄
第一章 生物大分子制備和分析常用技術(shù)
第一節(jié) 概論
一、預(yù)處理和細(xì)胞的分離
(一)選擇材料及預(yù)處理
(二)細(xì)胞的分離
二、細(xì)胞的破碎及細(xì)胞器的分離
第二節(jié) 電泳技術(shù)
一、基本原理
二、影響電泳的因素
三、醋酸纖維素薄膜電泳
(一)核酸分子大小與瓊脂糖濃度的關(guān)系
(二)核酸構(gòu)型與瓊脂糖凝膠電泳分離的關(guān)系
(三)瓊脂糖凝膠電泳基本方法
五、常規(guī)聚丙烯胺凝膠電泳
(一)聚丙烯酰胺凝膠聚合原理及相關(guān)特性
(二)聚丙烯酰胺凝膠電泳原理
(三)操作方法
六、SDS?聚丙烯酰胺凝膠電泳原理
七、聚丙烯酰胺梯度凝膠電泳
八、聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳
(一)等電聚焦的原理
(二)pH梯度的形成
九、雙向凝膠電泳
十、染色方法
(一)蛋白質(zhì)染色
(二)核酸染色
第三節(jié) 色譜技術(shù)
一、色譜技術(shù)的概念
二、色譜法的分類
(一)按兩相所處的狀態(tài)分類
(二)按色譜的分離機(jī)制分類
三、常用的色譜方法
(一)凝膠色譜
(二)離子交換色譜
(三)親和色譜
(四)高效液相色譜
(五)毛細(xì)管電泳
第四節(jié) 離心技術(shù)
一、離心理論
(一)離心分離的原理
(二)相對離心力和離心時間
(三)離心機(jī)的分類
二、離心分離的種類
(一)差速離心法
(二)密度梯度離心法
三、離心操作注意事項
第五節(jié) 分光光度技術(shù)
一、基本原理——朗伯?比爾定律
二、分光光度技術(shù)的應(yīng)用
(一)定量分析
(二)定性分析
第一節(jié) 蛋白質(zhì)的提取、分離純化及定量
一、蛋白質(zhì)(包括酶)的提取
(一)水溶液提取法
(二)有機(jī)溶劑提取法
二、蛋白質(zhì)的分離純化
(一)根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同進(jìn)行分離的方法
(二)利用色譜技術(shù)對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化
(三)利用電泳技術(shù)對蛋白質(zhì)進(jìn)行純化分離
(四)利用超速離心分離制備蛋白質(zhì)
(五)膜分離技術(shù)在蛋白質(zhì)分離純化中的應(yīng)用
(六)重組蛋白的分離純化
(七)分離制備蛋白質(zhì)的一個實例
三、蛋白質(zhì)的定量
第二節(jié) 脫氧核糖核酸的提取與分離
一、質(zhì)粒DNA的提取與分離
(一)質(zhì)粒提取的一般步驟
(二)質(zhì)粒DNA的小量制備
(三)質(zhì)粒DNA的大量制備
二、染色體DNA的提取與分離
(一)從培養(yǎng)細(xì)胞中提取DNA
(二)從組織中提取DNA
(三)從大量血樣的白細(xì)胞中分離高分子量DNA
(四)從小量血樣的白細(xì)胞中分離高分子量DNA
(五)高分子量DNA的小量快速制備
第三節(jié) 核糖核酸的提取與分離
一、組織培養(yǎng)細(xì)胞胞質(zhì)RNA的制備
二、胍鹽法制備總RNA
(一)氯化純化培養(yǎng)細(xì)胞的RNA
(二)氯化銫純化組織中的RNA
(三)一步法從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中分離RNA
三、細(xì)菌RNA的制備
(一)從革蘭陰性菌中分離高質(zhì)量RNA
(二)革蘭陽性菌RNA的分離
(三)革蘭陰性菌RNA的快速分離
四、poly(A)+RNA的制備
第四節(jié) 核酸的定量測定
一、紫外分光光度法測定脫氧核糖核酸和RNA的含量
三、定磷法測定核酸
四、二苯胺法測定DNA含量
第三章PCR技術(shù)77
第一節(jié)PCR技術(shù)基礎(chǔ)77
一、基本原理77
(一)反應(yīng)過程77
(二)產(chǎn)物類型78
(三)平臺效應(yīng)78
二、PCR技術(shù)的特點79
三、標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)79
四、影響因素80
(一)模板80
(二)引物81
(三)循環(huán)參數(shù)82
(四)Taq DNA聚合酶及其濃度83
(五)Mg2+濃度83
(六)dNTP濃度83
(七)其他輔助試劑84
五、擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測分析84
(二)聚丙烯酰胺凝膠電泳85
(三)核酸探針雜交鑒定法85
(四)限制性內(nèi)切酶分析法85
(五)單鏈構(gòu)型多態(tài)性分析法86
六、PCR條件優(yōu)化86
(一)常規(guī)的優(yōu)化方法86
(二)降落PCR86
七、PCR常見問題與對策87
(一)PCR污染87
(二)污染的預(yù)防87
(三)實驗中的對照87
(四)擴(kuò)增反應(yīng)總是陰性結(jié)果(無產(chǎn)物)時應(yīng)采取的措施87
(五)出現(xiàn)非特異性產(chǎn)物時應(yīng)采取的措施88
第二節(jié)PCR技術(shù)的擴(kuò)展88
一、逆轉(zhuǎn)錄PCR88
二、定量PCR89
(一)利用參照物的定量方法89
(二)競爭性定量PCR89
(三)熒光定量 PCR90
三、重組PCR91
四、反向PCR92
五、不對稱PCR92
六、復(fù)合PCR92
七、著色互補(bǔ)PCR 93
八、錨定PCR93
九、原位PCR93
十、膜結(jié)合PCR93
十一、固著PCR93
十二、增效PCR94
第三節(jié)PCR技術(shù)的應(yīng)用94
一、PCR技術(shù)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用94
二、PCR技術(shù)在傳染病病原體檢測中的應(yīng)用95
三、PCR在腫瘤相關(guān)基因檢測中的應(yīng)用96
四、 PCR技術(shù)在遺傳病早期診斷中的應(yīng)用97
五、PCR在骨髓移植HLAD位點配型中的應(yīng)用98
六、 PCR技術(shù)在法醫(yī)學(xué)鑒定中的應(yīng)用98
七、 PCR在進(jìn)化分析中的應(yīng)用99
第四章分子雜交與印跡技術(shù)100
第一節(jié)核酸雜交的基本理論100
一、 脫氧核糖核酸變性、復(fù)性及雜交100
二、核酸探針101
三、核酸雜交方法102
(一)影響雜交的因素102
(二)固相雜交法103
(三)液相雜交法 104
(四)雜交信號的檢測107
第二節(jié)常用印跡雜交方法107
一、 Southern印跡雜交法107
二、 Northern印跡雜交法111
三、斑點及狹縫印跡雜交113
四、菌落原位雜交法 113
五、核酸原位雜交法115
(一)組織與細(xì)胞的固定115
(二)載片和組織切片的處理115
(三)雜交116
(四)雜交后處理118
(五)顯示119
(六)對照實驗和核酸原位雜交結(jié)果的判斷119
六、 Western印跡雜交法120
(一)蛋白質(zhì)的分離120
(二)轉(zhuǎn)膜120
(三)鑒定用膜的準(zhǔn)備121
(四)鑒定122
第五章分子克隆技術(shù)123
第一節(jié)概述123
一、分子克隆的基本步驟123
二、分子克隆研究的內(nèi)容124
(一)分子克隆工具的研究124
(二)分子克隆技術(shù)的研究124
(三)克隆對象——目的基因的研究124
(四)分子克隆產(chǎn)品的研究124
第二節(jié)克隆操作中需要的工具酶125
一、限制性核酸內(nèi)切酶125
(一)限制性核酸內(nèi)切酶的類別126
(二)同工異源酶與同尾酶127
(三)限制性核酸內(nèi)切酶活性及其影響因素128
二、 脫氧核糖核酸連接酶128
三、 DNA聚合酶129
(一)DNA聚合酶Ⅰ129
(二)Klenow酶129
(三)Taq DNA聚合酶129
(四)反轉(zhuǎn)錄酶130
(五)T4 DNA聚合酶130
(六)T7 DNA聚合酶131
四、修飾酶131
(一)堿性磷酸酶131
(二)末端轉(zhuǎn)移酶132
(三)T4多核苷酸激酶132
(四)S1核酸酶132
第三節(jié)基因克隆載體133
一、質(zhì)粒載體133
二、噬菌體載體135
三、黏粒載體137
第四節(jié)基因克隆的一般方法137
一、獲得目的基因的常用方法137
(一)化學(xué)合成法137
(二)逆轉(zhuǎn)錄PCR克隆目的基因138
(三)PCR方法克隆目的基因139
(四)利用基因表達(dá)差異的克隆方法139
二、目的基因與載體連接141
(一)具黏性末端的脫氧核糖核酸片段之間的連接141
(二)平末端的連接142
三、構(gòu)建文庫克隆目的基因143
(一)構(gòu)建cDNA文庫克隆目的基因143
(二)構(gòu)建基因組文庫克隆目的基因147
四、利用差異文庫的克隆方法150
(一)差別雜交和扣除雜交克隆的目的基因150
(二)代表性差別分析技術(shù)克隆目的基因151
(三)抑制性扣除雜交技術(shù)153
第五節(jié)克隆篩選與鑒定155
一、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞155
二、重組體的篩選與鑒定156
(一)根據(jù)遺傳表型的篩選方法156
(二)依賴重組子結(jié)構(gòu)特征的篩選法158
第六章外源基因轉(zhuǎn)移技術(shù)160
第一節(jié)外源基因?qū)?a href="/hebeideji/9064087049401013624.html">原核生物的常用方法160
一、自然條件下的轉(zhuǎn)化現(xiàn)象160
二、受體細(xì)胞的選擇161
三、轉(zhuǎn)化方法162
(一)氯化鈣誘導(dǎo)大腸桿菌轉(zhuǎn)化法162
(二)電穿孔驅(qū)動的完整細(xì)胞轉(zhuǎn)化164
(三)聚乙二醇介導(dǎo)的細(xì)菌原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化164
(五)λ噬菌體的轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)染165
四、轉(zhuǎn)化率及其影響因素166
第二節(jié)外源基因?qū)?a href="/hebeideji/7480319746857246347.html">真核生物的方法167
一、物理方法168
二、化學(xué)方法170
三、生理方法174
第三節(jié)病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移175
一、核糖核酸病毒載體及其介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移175
(一)逆轉(zhuǎn)錄病毒175
(二)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體176
二、DNA病毒載體及其介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移179
(一)腺病毒載體179
(二)腺病毒科相關(guān)病毒載體180
(三)皰疹病毒載體180
(四)嵌合(雜合)病毒載體181
第四節(jié)報告基因的應(yīng)用181
一、報告基因及其應(yīng)用范圍181
(一)報告基因181
(二)報告基因的應(yīng)用182
二、常見的幾種報告基因及其應(yīng)用183
(一)熒光素酶183
(二)綠色熒光蛋白184
(三)氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(cat)187
(四)β半乳糖酶187
(五)分泌型的堿性磷酸酶(SEAP)188
(六)人生長激素(hGH)188
(七)β葡糖醛酸酶(GUS)189
第七章蛋白質(zhì)表達(dá)技術(shù)190
第一節(jié)外源基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)190
一、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)190
(一)大腸桿菌表達(dá)載體的表達(dá)元件190
(二)大腸桿菌的表達(dá)載體194
(三)外源基因在大腸桿菌中表達(dá)197
(四)提高外源基因表達(dá)水平的措施199
(五)包含體200
二、芽孢桿菌表達(dá)系統(tǒng)201
(一)芽孢桿菌基因表達(dá)的特點201
(二)芽孢桿菌表達(dá)系統(tǒng)202
(三)存在的問題203
三、鏈霉菌表達(dá)系統(tǒng)204
(一)鏈霉菌的生物學(xué)特征204
(二)鏈霉菌基因表達(dá)的特點205
(三)鏈霉菌基因表達(dá)系統(tǒng)206
(四)影響鏈霉菌中基因表達(dá)的因素208
(五)鏈霉菌表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)缺點209
第二節(jié)外源基因在真核生物中的表達(dá)209
一、酵母表達(dá)系統(tǒng)209
(一)酵母表達(dá)系統(tǒng)的組成210
(二)酵母表達(dá)系統(tǒng)的應(yīng)用策略213
二、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)216
(一)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)216
(二)家蠶核型多角體病毒(BmNPV)表達(dá)系統(tǒng)220
第三節(jié)哺乳綱細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)220
一、哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)成221
(一)宿主細(xì)胞221
(二)表達(dá)載體222
(三)目的基因225
二、常用的細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)225
三、基因的導(dǎo)入方法226
四、外源基因在哺乳細(xì)胞的表達(dá)和基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測226
五、哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的改進(jìn)策略226
(一)改進(jìn)表達(dá)載體,提高表達(dá)水平226
(二)改造宿主細(xì)胞及培養(yǎng)手段228
(三)提高產(chǎn)品質(zhì)量229
(四)篩選高表達(dá)細(xì)胞克隆的新方法230
第四節(jié)重組蛋白的檢測與鑒定230
一、定量分析230
二、純度分析230
三、重組蛋白質(zhì)的鑒定231
第八章分子標(biāo)記技術(shù)233
第一節(jié)概述233
一、放射性同位素233
(一)放射性同位素的基本性質(zhì)233
(二)放射性強(qiáng)度及其度量單位234
(三)射線與物質(zhì)的相互作用234
(四)射線的防護(hù)234
二、放射性同位素標(biāo)記235
三、非同位素標(biāo)記236
(一)發(fā)光信號的特點236
(二)化學(xué)發(fā)光的本質(zhì)237
(三)生物發(fā)光237
(四)熒光的基礎(chǔ)237
第二節(jié)核酸的標(biāo)記238
一、放射性同位素標(biāo)記探針238
(一)切口平移法238
(二)末端標(biāo)記法240
(三)隨機(jī)引物法標(biāo)記脫氧核糖核酸片段243
(四)聚合酶鏈反應(yīng)標(biāo)記高活性DNA探針244
二、非放射性同位素標(biāo)記244
(一)間接非同位素標(biāo)記245
(二)用生物素、地高辛或熒光素標(biāo)記探針的方法245
(三)DIG標(biāo)記實例248
(四)直接非同位素標(biāo)記249
第三節(jié)蛋白質(zhì)的標(biāo)記250
一、熒光標(biāo)記250
(一)利用氨基的標(biāo)記方法250
(二)利用基的標(biāo)記方法252
(三)利用醇羥基的標(biāo)記方法253
二、利用酶、酶的底物及酶抑制劑的標(biāo)記253
(一)糖苷酶及其底物254
(二)磷酸酶類及其底物254
(三)其他酶與底物255
(四)生物素與親和素系統(tǒng)255
三、利用抗體的標(biāo)記技術(shù)256
(一)免疫熒光標(biāo)記技術(shù)256
(二)放射免疫標(biāo)記技術(shù)257
(三)酶免疫標(biāo)記技術(shù)258
(四)膠體金標(biāo)記技術(shù)258
(五)發(fā)光免疫標(biāo)記技術(shù)259
第九章分子改造技術(shù)261
第一節(jié)概述261
第二節(jié)蛋白質(zhì)的體外改造262
一、寡聚核苷酸指導(dǎo)的誘變方法262
(一)非PCR的誘變方法263
(二)PCR方法 263
(三)誘變寡核苷酸的設(shè)計265
二、隨機(jī)誘變266
(一)化學(xué)誘變266
(二)丙氨酸掃描誘變267
三、突變體篩選方法267
(一)限制酶切割區(qū)分親本模板與突變產(chǎn)物268
(二)單一限制位點的消除268
四、分子進(jìn)化268
(一)概念268
(二)基本方法269
第三節(jié)蛋白質(zhì)改造技術(shù)的應(yīng)用271
一、點突變271
二、結(jié)構(gòu)域改組271
三、全蛋白的重組272
第四節(jié)單克隆抗體的改造273
一、抗體的產(chǎn)生和抗體的結(jié)構(gòu)274
二、多抗、單抗及重組抗體275
三、抗體改造276
(一)人鼠嵌合抗體276
(二)小分子抗體277
(三)雙功能抗體277
(四)抗體融合蛋白278
第十章測序及人工合成技術(shù)279
第一節(jié)脫氧核糖核酸序列測定279
一、Sanger雙脫氧鏈終止法279
(一)Sanger雙脫氧鏈終止法的原理279
(二)Sanger雙脫氧鏈終止法所需關(guān)鍵試劑280
(三)用于測序的變性凝膠電泳282
(四)大片段DNA的測序策略282
二、MaxamGilbert化學(xué)修飾法283
(一)化學(xué)裂解法測序的原理283
(二)化學(xué)試劑特異斷裂DNA的機(jī)制284
三、DNA序列的自動測序284
第二節(jié)DNA的化學(xué)合成285
一、脫氧核糖核酸化學(xué)合成的原理286
(一)磷酸三法合成寡核苷酸的原理286
(二)固相亞磷酸三酯法合成寡核苷酸的原理286
(三)用寡聚核苷酸片段組裝基因的方式288
二、DNA合成技術(shù)在分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用289
第三節(jié)蛋白質(zhì)和多肽的氨基酸序列測定291
一、序列測定前的準(zhǔn)備291
(一)蛋白質(zhì)純化291
(二)肽鏈的分離292
(三)肽鏈的部分裂解292
(四)肽片段的分離293
二、序列測定的方法和原理294
(一)手工測序294
(二)自動序列分析297
三、影響測序的因素298
第四節(jié)蛋白質(zhì)或多肽的化學(xué)合成298
一、氨基酸官能團(tuán)的保護(hù)299
二、羧基的活化和肽鍵的生成301
三、合成肽的脫保護(hù)基及純化302
第十一章基因組學(xué)技術(shù)305
第一節(jié)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)及常用研究技術(shù)305
一、基因組作圖305
二、新基因的分離——cDNA末端快速擴(kuò)增(RACE)技術(shù)307
三、基因組序列測定技術(shù)310
四、基因定位技術(shù)311
(一)熒光原位雜交(FISH)技術(shù)311
(二)輻射雜種細(xì)胞系(RH)技術(shù)312
第二節(jié)功能基因組學(xué)及常用研究技術(shù)312
一、基因突變檢測(分析)技術(shù)313
(一)單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)技術(shù)313
(三)直接測序法317
(四)單堿基延伸標(biāo)簽陣列技術(shù)( SBETAGS)318
(五)異源雙鏈分析技術(shù)318
(六)連接酶鏈反應(yīng)318
(八)核糖核酸酶A切割法319
(九)基于PCR與酶切的技術(shù)319
(十)高通量檢測技術(shù)320
二、比較基因組雜交技術(shù)321
三、微陣列比較基因組雜交技術(shù)323
四、染色體原位雜交325
五、基因表達(dá)分析技術(shù)325
(一)基因表達(dá)系列分析技術(shù)(SAGE)326
(二)RNase保護(hù)試驗(RPA)328
六、模式生物體研究328
(一)轉(zhuǎn)基因動物329
(二)基因打靶技術(shù)334
(三)時空可調(diào)節(jié)性基因打靶技術(shù)337
(四)基因陷阱338
(五)誘變技術(shù)在功能基因組學(xué)中的應(yīng)用341
七、SNP、EST在研究新(未知)基因中的應(yīng)用341
(一)單核苷酸多態(tài)性(SNP)341
(二)表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)343
第十二章蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)345
第一節(jié)概述345
一、蛋白質(zhì)組學(xué)研究的意義和背景345
二、蛋白質(zhì)組學(xué)研究的特點346
第二節(jié)蛋白質(zhì)組學(xué)研究的技術(shù)體系與路線350
一、蛋白質(zhì)組分離技術(shù)350
(一)雙向凝膠電泳的特點350
(二)雙向凝膠電泳的基本步驟351
(三)蛋白質(zhì)組分離的非凝膠技術(shù)356
二、蛋白質(zhì)組分析技術(shù)358
三、蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫的建立和生物信息學(xué)學(xué)359
四、蛋白質(zhì)組研究的發(fā)展趨勢及應(yīng)用前景359
第三節(jié)蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺與完整解決方案360
一、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺360
二、蛋白質(zhì)組學(xué)研究的完整解決方案361
第十三章生物芯片技術(shù)364
第一節(jié)概述364
一、生物芯片的概念和特點364
二、生物芯片的分類365
第二節(jié)基因芯片366
一、基本原理366
二、基因芯片的制備和檢測366
(一)芯片載體的表面修飾366
(二)芯片陣列制作方式367
(三)雜交探針的種類與制備368
(四)樣品制備和標(biāo)記370
(五)雜交370
(六)雜交信號采集和處理371
(七)生物信息的分析和提取371
第三節(jié)蛋白質(zhì)芯片373
一、基本原理374
二、蛋白質(zhì)芯片制備和檢測的基本流程377
(一)蛋白質(zhì)芯片制備與檢測流程377
(二)待檢樣品的制備和標(biāo)記379
(三)蛋白質(zhì)芯片的雜交反應(yīng)和結(jié)果檢測380
三、蛋白質(zhì)芯片的研究進(jìn)展381
(一)方法學(xué)研究和新技術(shù)的應(yīng)用381
(二)抗體芯片382
第四節(jié)生物芯片在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用382
一、基因芯片在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用382
(一)微縮實驗室芯片382
(二)基因突變分析383
(三)克隆選擇及文庫篩選383
(四)測序芯片384
(五)基因多態(tài)性分析384
(六)基因表達(dá)譜分析384
(七)微生物菌種鑒定、致病機(jī)理及耐藥性分析385
(八)藥物篩選芯片385
二、蛋白質(zhì)芯片在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用385
(一)蛋白質(zhì)組基因組鏈接385
(二)高通量的蛋白質(zhì)表達(dá)篩選及藥物研究386
(三)蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)之間相互作用的研究386
(四)在疾病診斷方面的應(yīng)用388
(五)展望388
第十四章生物信息學(xué)技術(shù)390
第一節(jié)概述390
一、生物信息學(xué)的誕生和發(fā)展390
二、生物信息學(xué)研究的基本方法390
三、生物信息學(xué)的目的意義391
第二節(jié)常用核酸序列數(shù)據(jù)庫392
第三節(jié)常用蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫398
第四節(jié)序列分析402
一、序列比對方法和相似性搜索403
二、FASTA404
三、BLAST405
第五節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測410
一、二級結(jié)構(gòu)和折疊類型410
二、三級結(jié)構(gòu)預(yù)測411
第十五章核糖核酸研究技術(shù)414
第一節(jié)RNA結(jié)構(gòu)分析和合成分析414
一、用單鏈DNA探針和S1核酸酶分析mRNA414
二、核糖核酸酶保護(hù)測定419
三、引物延伸法422
四、RNA runon分析424
第二節(jié)RNA組學(xué)技術(shù)425
一、反義核酸技術(shù)426
(一)反義RNA作用機(jī)制426
(二)反義RNA 技術(shù)方法427
(三)反義RNA技術(shù)應(yīng)用428
二、RNA干擾(RNAi)技術(shù)428
(一)RNAi作用的機(jī)制429
(二)RNAi實驗方案430
(三)RNAi敏感性的預(yù)測432
(四)siRNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞433
(五)結(jié)果分析434
(六)RNAi在基因功能分析中的應(yīng)用434
第三節(jié)核酶技術(shù)434
第四節(jié)核糖核酸錯折疊(ODMiR)技術(shù)436
附錄438
參考文獻(xiàn)451
參考資料 >
分子生物學(xué)實驗技術(shù).豆瓣.2018-10-16
3.3.2018-10-18