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基因工程概論
來源:互聯網

《基因工程概論》是1999年12月華東理工大學出版社出版的圖書,作者是張惠展。本書從基因的表達調控機制入手,將脫氧核糖核酸重組技術歸納為切、接、轉、增、檢五大基本操作單元,進而按照受體細胞的生物學分類,逐一展開各系統基因工程的原理與應用。重點論述基因工程技術應用的策略與思路并力求以圖解的方式取代繁瑣的文字敘述,是本書努力和體現的兩大特色。

內容提要

世界的豐富多彩是因為生命的存在,而生命誕生、發育、生長、病變、衰老乃至死亡的整個過程均由基因控制。DNA或核糖核酸鏈上堿基的線性排列順序編碼著生命運動的時空四維信息,甚至連高等哺乳綱和人類的思維與智商亦與基因有關。因此,目前人類正在努力實施規模宏偉的基因組研究計劃,期望由此認識生命,改造生命,優化生命。

圖書目錄

1 概述

1.1 基因工程的基本概念

1.2 基因工程的發展歷史

1.3 基因工程研究的意義

2 基因的表達調控原理

2.1 啟動子調控模型

2.2 操縱子調控模型

2.3 感受應答調控模型

2.4 核糖核酸結構調控模型

2.5 RNA剪切編輯調控模型

3 脫氧核糖核酸重組克隆的單元操作

3.1 DNA重組的載體

3.2 DNA的體外重組(切與接)

3.3 重組DNA分子的轉化與擴增(轉與增)

3.4 轉化子的篩選與重組子的鑒定(檢)

3.5 目的基因的克隆

4 大腸桿菌基因工程的原理與應用

圖書信息2

書名:基因工程概論

書號:9787302164944

作者:賀淹才

定價:45元

出版日期:2008-4-1

出版社:清華大學出版社

內容簡介

本書共分16 章,系統地闡述了基因工程的原理與技術。全書條理清晰,文筆流暢,圖文并茂,內容實用,適合作為高等院校生命科學相關專業本科生教材,也可供相關專業研究人員參考。

目錄

第一章 緒論/1

第一節 基因與基因工程的概念/1

一、基因/1

二、人類基因組計劃/5

三、基因工程的概念/6

第二節 基因工程發展史/7

第三節 基因工程的巨大意義/8

第四節 生物技術與基因工程/10

第五節 中國基因工程的現狀與前景/10

第六節 基因工程的安全性問題/13

第七節 我國的《基因工程安全管理辦法》/15

第八節 基因工程的基本過程/16

第九節 基因工程上游和下游/16

第十節 基因工程的上游工程——基因克隆/17

第十一節 基因工程的流程/17

復習思考題/18

第二章 各種工具酶/19

第一節 基因工程工具酶的概念/19

第二節 限制性內切核酸酶/20

一、寄主細胞控制的限制與修飾/20

二、限制性核酸內切酶的種類/21

三、影響限制性內切酶活性的因素/24

四、限制性內切酶命名法/24

五、限制性內切酶的作用特點與應用/25

六、脫氧核糖核酸的限制酶分析及物理圖譜/25

第三節DNA聚合酶/27

一、大腸桿菌DNA 聚合酶I /28

二、DNA聚合酶Ⅰ大片段/30

三、大腸桿菌DNA 聚合酶Ⅱ/31

四、大腸桿菌DNA 聚合酶Ⅲ /31

五、T4-DNA 聚合酶/32

六、T7噬菌體DNA 聚合酶及測序酶/33

七、耐熱DNA 聚合酶(TaqDNA 聚合酶) /33

八、末端轉移酶/35

九、反轉錄酶/35

十、真核生物的DNA 聚合酶/37

第四節脫氧核糖核酸連接酶/37

一、DNA 連接酶的一般性質/37

二、DNA 連接酶的作用機制/38

三、真核生物的DNA 連接酶/40

第五節S1核酸酶/40

第六節Bal31核酸酶/41

第七節 堿性磷酸酶/41

第八節T4多聚核酸激酶/42

復習思考題/42

第三章 基因載體的選擇與構建/43

第一節 基因載體、報告基因與載體的致死效應/43

一、基因載體的概念/43

二、載體的報告基因(標記基因) /44

三、載體的致死效應/44

第二節 細菌質粒載體/45

一、質粒的概念/45

二、質粒的復制和遺傳/46

三、質粒的種類/46

四、質粒的相容性/47

五、質粒的報告基因/48

六、質粒的改造/49

七、質粒載體的多克隆位點/50

八、質粒脫氧核糖核酸 的提取/50

九、常用的質粒載體/52

十、質粒的用途與發展的質粒克隆載體/56

第三節 噬菌體載體/60

一、噬菌體和噬菌體載體/60

二、λ噬菌體的生物學/60

三、野生型λ 噬菌體的改造/64

四、λ噬菌體的包裝與克隆/65

五、單鏈噬菌體載體和噬菌粒/68

六、黏性質粒載體/70

第四節 酵母細胞克隆載體與酵母人工染色體/72

一、酵母附加體型質粒(YEps) /73

二、酵母整合型質粒(YIps) /74

三、酵母復制型質粒(YRps)與酵母著絲粒質粒(Ycps) /75

四、酵母人工染色體(YAC) /75

五、細菌人工染色體(BAC)和噬菌體人工染色體(PAC) /77

六、穿梭質粒/79

第五節 動物病毒載體/81

一、動物病毒載體的特點/81

二、桿狀病毒載體/81

三、SV40載體/84

四、痘苗病毒載體/86

五、反轉錄病毒載體/86

六、其他動物病毒載體/88

第六節 植物病毒載體/88

復習思考題/89

第四章 目的基因的制取/91

第一節 目的基因制取的策略/91

一、外源基因與目的基因/91

二、目的基因制取的策略/91

第二節 鳥槍法制取目的基因/92

一、“鳥槍法”的概念/92

二、“鳥槍法”制取目的基因的特點/93

三、“鳥槍法”的主要步驟/94

四、枯草芽孢桿菌鳥槍法基因克隆/94

第三節 物理化學法分離目的基因/95

第四節 化學合成基因/95

一、聚核苷酸化學合成的歷史/96

二、磷酸二法合成脫氧核糖核酸 /97

三、固相亞磷酰胺法/98

四、DNA合成在基因工程和分子生物學研究中的應用/100

第五節 反轉錄合成DNA /102

復習思考題/104

第五章 基因與載體的連接/105

第一節 基因重組克隆與亞克隆/105

第二節 基因重組對載體的要求與載體類型/106

一、克隆載體/106

二、表達載體/106

第三節 連接前的處理/107

第四節 黏性末端連接/108

一、單酶切位點的黏端連接/108

二、雙酶切片段的定向克隆/111

三、不同限制酶切位點的黏端連接/112

第五節 平端連接/114

第六節 人工接頭連接/116

第七節 同聚寡聚核苷酸末端連接/118

復習思考題/120

第六章 重組脫氧核糖核酸 導入受體細胞/121

第一節 克隆與導入方法/121

第二節 轉化/122

一、大腸桿菌宿主菌/122

二、受體細菌的感受態/123

三、轉化反應/123

四、枯草芽孢桿菌的轉化反應/124

第三節 轉染/125

一、磷酸鈣沉淀法/125

二、體外包裝轉染法/126

第四節 共轉化/126

第五節 電轉化/127

第六節 基因槍法(微彈技術) /129

第七節 微注射技術/130

第八節 脂質體導入法/131

第九節 轉化酵母菌/132

第十節 植物細胞的基因轉移方法/133

第十一節 哺乳綱細胞基因導入法/133

第十二節 反轉錄病毒載體的轉染/135

復習思考題/136

第七章 聚合酶鏈式反應/137

第一節PCR技術基本原理/137

第二節PCR反應體系與引物設計/141

一、PCR反應體系/141

二、設計PCR 引物時的一般原則/143

第三節PCR一般循環參數/144

第四節 影響PCR反應結果的因素/145

第五節PCR技術用于基因克隆/146

一、目的基因的直接克隆/146

二、目的基因的cDNA 的克隆/146

三、PCR技術用于基因克隆的其他方式/147

第六節 發展中的各種PCR應用技術/147

一、反轉錄PCR /147

二、反向PCR /149

三、復合PCR /150

四、定量PCR /153

五、不對稱PCR /153

六、嵌套PCR /154

七、免疫PCR /154

八、長PCR /155

九、熱啟動PCR /155

十、標記PCR(彩色PCR) /155

十一、重組PCR /156

十二、差向顯示PCR /156

十三、降落PCR /156

十四、兼并引物PCR /157

十五、原位PCR /157

十六、玻片PCR /158

十七、連接酶鏈反應(LCR) /158

十八、MSP甲基化特異PCR /160

第七節 各種PCR突變檢測技術/160

第八節 關于PCR技術應用的小結/162

復習思考題/162

第八章 基因文庫的構建/163

第一節 基因文庫的概念與文庫的類別/163

一、基因文庫的概念/163

二、基因文庫的類別/163

三、基因文庫的大小/165

第二節 基因文庫的構建/167

一、基因組文庫的構建/167

二、cDNA文庫的構建/171

第三節 利用PCR技術構建cDNA文庫/176

第四節 全長cDNA文庫的構建/178

一、cDNA文庫的質量與全長cDNA /178

二、RACE構建cDNA 文庫/179

三、用oligocapping 法構建全長cDNA 文庫/181

四、smart技術/183

第五節 差示文庫與消減文庫/186

一、mRNA差別顯示/186

二、差別雜交法與差示文庫/188

三、消減雜交法與消減文庫/190

四、代表性差異顯示(RDA) /192

五、抑制消減雜交/194

第六節 染色體或區域特異性cDNA文庫/197

第七節 人工染色體文庫/198

一、酵母人工染色體(YAC)文庫/198

二、細菌人工染色體(BAC)文庫/200

復習思考題/202

第九章 重組體的鑒定與文庫篩選/203

第一節 重組體轉化子的鑒定與文庫篩選/203

第二節 遺傳檢測篩選法/204

一、根據載體表型特征的直接選擇法/204

二、根據插入序列表型特征的直接選擇法/205

第三節 物理檢測法/205

一、凝膠電泳檢測法/205

二、限制酶切分析法/208

三、異源雙鏈雜交檢測法與R-環檢測法/208

第四節 核酸雜交法/209

一、以寡聚核苷酸探針篩選目的基因/209

二、原位雜交與寡核苷酸探針篩選文庫/212

三、Southern印跡雜交/213

四、Northern印跡雜交/214

第五節 免疫化學檢測法/214

一、各種標記的免疫化學檢測法/215

二、以單克隆抗體探針篩選目的基因/216

三、表達載體產物免疫化學檢測法/217

第六節 檢測蛋白質篩選克隆基因/217

第七節 體外表達篩選技術(表達檢測系統) /220

第八節cDNA文庫篩選的方法/223

第九節cDNA文庫的標準化/225

第十節BAC文庫鑒定和篩選/229

復習思考題/230

第十章 目的基因的表達/231

第一節 原核生物基因表達調控的生物學/231

一、原核細胞表達的特點/231

二、原核生物的轉錄調控/231

三、原核生物基因的轉錄后調控/233

第二節 真核生物基因表達的調控/234

一、脫氧核糖核酸染色質結構的調控與順反子的概念/234

二、轉錄調控/234

三、核糖核酸對基因表達的調控/235

四、翻譯過程的調控/235

第三節 基因工程中的基因表達/235

一、制約目的基因表達的因素/235

二、閱讀框架/236

三、啟動子及其保守序列的影響/236

四、終止子和衰減子的影響/237

五、翻譯過程對表達的影響/238

第四節 融合基因與融合蛋白的表達/239

第五節 以大腸桿菌為代表的原核生物表達體系/240

一、大腸桿菌表達系統的特點/240

二、大腸桿菌表達融合蛋白/240

三、大腸桿菌細胞包涵體/241

四、提高克隆基因在大腸桿菌中表達效率的途徑/242

第六節 表達型載體/243

第七節 真核生物表達體系的特點與外源基因在真核細胞表達/248

第八節 酵母表達體系/248

一、釀酒酵母中外源基因的表達/249

二、甲醇酵母中外源基因的表達/249

三、出芽酵母中外源基因的表達/249

四、常用的酵母轉化方法/250

五、酵母表達外源基因的缺陷和改進方法/250

第九節 昆蟲或昆蟲細胞表達體系/251

第十節 哺乳綱細胞表達體系/254

第十一節 新型的胞漿表達體系/254

復習思考題/255

第十一章 轉座子在基因工程中的應用/256

一、脫氧核糖核酸的轉座現象與轉座子/256

二、質粒的轉座子/259

三、轉座作用的機制/259

四、轉座的遺傳學效應/260

五、控制轉座與監測轉座子/261

六、轉座子基因標簽法/261

七、標簽的策略/264

八、標簽基因的分離和克隆/265

九、轉座子技術的發展與應用前景/268

復習思考題/269

第十二章 核苷酸序列測定/270

一、Sanger酶法(雙脫氧鏈終止法) /270

二、Maxam-Gilbert 脫氧核糖核酸 化學降解法/273

三、定向測序法/276

四、鳥槍法測序/278

五、人工轉座子法/282

六、雜交測序技術/282

七、PCR測序/285

八、自動化測序法/286

九、幾種正在發展的測序方法/287

十、DNA序列測定的策略與發展方向/291

復習思考題/292

第十三章 基因克隆的策略和技術/293

第一節 基因克隆方法的種類/293

第二節 經典文庫克隆與特異抗體克隆技術/294

第三節 定位克隆策略/295

一、定位克隆的基本原理/295

二、定位克隆的三個主要步驟/297

三、定位克隆的主要操作過程/299

四、定位克隆的主要策略/303

五、大片段脫氧核糖核酸 克隆文庫的載體/305

六、功能互作研究與定位克隆的應用與發展/305

第四節 表型克隆的策略/308

一、基因組錯配篩選(GMS) /308

二、隨機引物PCR /310

三、外顯子擴增技術(exon-PCR) /311

四、表型克隆與定位克隆策略的比較/311

第五節cDNA克隆策略/312

第六節 生物信息學基因克隆技術/313

復習思考題/317

第十四章 基因打靶、反義技術與核酶技術/318

第一節 基因打靶技術/318

一、基因打靶的主要實驗系統/318

二、基因打靶的主要步驟/319

三、篩選基因打靶命中的細胞株/320

四、基因打靶技術的策略與技術/321

五、大規模隨機基因剔除——基因捕獲/324

六、基因敲入法研制轉基因小鼠/325

七、基因打靶技術的特點/326

八、基因打靶技術的應用/326

第二節 反義技術/327

一、反義鏈與反義寡聚核苷酸/327

二、反義技術的原理/329

三、人工設計反義核糖核酸 的策略/329

四、反義技術的特點/331

五、ASON的改造與反義藥物/331

第三節 核酶技術/331

一、核酶的特性與作用/331

二、核酶的設計/332

三、核酶的克隆和應用/333

第四節 反義技術與核酶技術的應用/333

復習思考題/336

第十五章 蛋白質工程/337

第一節 蛋白質工程與基因工程/337

第二節 蛋白質結構分析、功能的設計與改造/338

一、蛋白質結構分析/338

二、蛋白質結構、功能的設計/338

三、蛋白質結構改造/338

第三節 蛋白質工程的一般流程/341

第四節 功能克隆策略——噬菌體展示技術/341

一、絲狀噬菌體展示系統/342

二、T4噬菌體展示系統/343

三、λ噬菌體展示系統/344

四、噬菌體展示基本操作過程/347

五、抗體表面展示/351

第五節 細菌表面展示生物技術/352

一、革蘭陰性菌表面展示/353

二、革蘭陽性菌表面展示/353

第六節 酵母表面展示系統/354

第七節 其他體外展示技術/354

第八節 蛋白質工程的新策略——分子定向進化/355

一、易錯PCR /355

二、脫氧核糖核酸改組技術/355

三、交錯延伸技術/357

四、體外隨機引發重組/358

五、雜合酶技術/359

六、蛋白質分子定向進化技術的發展/359

第九節 蛋白質工程的應用與發展前景/360

復習思考題/361

第十六章 基因工程下游工程的分化/363

第一節 下游常用的分離、純化、分析鑒定技術/363

一、DNA合成粗產物的提純/363

二、蛋白質產品常用的分離提取技術/364

第二節 原核生物表達系統與發酵工程/366

第三節 植物基因工程/366

第四節 昆蟲或動物細胞表達系統/368

第五節 動物基因工程/368

第六節 基因工程與產業化/369

第七節 基因工程藥物與疫苗/371

第八節 基因治療/372

復習思考題/373

索引/374

參考文獻/386

參考資料 >

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