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志賀氏菌屬
來源:互聯(lián)網(wǎng)

志賀氏菌屬(Shigella)是一類革蘭氏陰性短小桿菌,無芽孢,無莢膜,無鞭毛,多數(shù)有菌毛。志賀氏菌屬隸屬于腸桿菌科,是腸道傳染病中最常見的致病菌,俗稱痢疾桿菌,常引起人類細(xì)菌性痢疾。志賀氏菌屬一般僅發(fā)現(xiàn)于痢疾病人及其接觸者的腸道中。沒有動力是痢疾桿菌與其他極大部分腸道致病菌的不同點(diǎn)。志賀氏菌屬的致病物質(zhì)主要是侵襲力和內(nèi)毒素。A群志賀氏菌I型及部分II型菌株能產(chǎn)生外毒素,稱為志賀氏毒素。不耐熱,引起細(xì)胞壞死、水樣腹瀉、神經(jīng)麻痹等。

志賀氏菌屬營養(yǎng)要求一般,于普通培養(yǎng)基上即可生長,為需氧菌兼性厭氧菌,在溫度10-40℃及pH6.4-7.8的條件下均能生長,但最適溫度為37℃,最適pH為7.2-7.4。志賀氏菌屬在普通瓊脂平板上形成直徑中等大小、半透明的光滑型菌落。宋內(nèi)氏志賀氏菌常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落。志賀氏菌屬多數(shù)發(fā)酵甘露醇。除宋內(nèi)志賀氏菌個(gè)別菌株遲緩發(fā)酵乳糖外,均不分解乳糖。

志賀氏菌屬有0抗原,無H抗原,個(gè)別菌株有K抗原。根據(jù)志賀氏菌0抗原構(gòu)造的不同,可分為4群48個(gè)血清型,即A群痢疾志賀氏菌、B群福氏志賀氏菌、C群鮑氏志賀氏菌、D群宋內(nèi)氏志賀氏菌。志賀氏菌的抵抗力較其他腸桿菌屬弱,加熱56Y10min可被殺死,在糞便中幾小時(shí)內(nèi)死亡,對酸敏感,對化學(xué)消毒劑敏感。耐藥菌株多。

志賀氏菌屬

志賀氏菌屬是一類革蘭氏陰性桿菌,是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌,通稱痢疾桿菌。

生物學(xué)特征

形態(tài)與染色

大小為0.5~0.7×2~3μm,無芽孢,無莢膜,無鞭毛。多數(shù)有菌毛。革蘭氏陰性桿菌。

培養(yǎng)特性

兼性厭氧菌,能在普通培養(yǎng)基上生長,形成中等大小,半透明的光滑型菌落。在腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落。

生化反應(yīng)

分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。VP試驗(yàn)陰性,不分解尿素,不形成硫化氫,不能利用枸酸鹽作為碳源。宋內(nèi)氏志賀氏菌能遲緩發(fā)酵乳糖(37℃ 3~4天)。

抗原構(gòu)造與分類

有K和O抗原而無H抗原。K抗原是自患者新分離的某些菌株的菌體表面抗原,不耐熱,加熱100℃1小時(shí)被破壞。K抗原在血清學(xué)分型上無意義,但可阻止O抗原與相應(yīng)抗血清的凝集反應(yīng)。O抗原分為群特異性抗原和型特異性抗原,前者常在幾種近似的菌種間出現(xiàn);型特異性抗原的特異性高,用物區(qū)別菌型。根據(jù)志賀氏菌抗原構(gòu)造的不同,可分為四群48個(gè)血清型(包括亞型)。

(1)A群:又稱痢疾志賀氏菌(shdysenteriae),通稱志賀氏痢疾桿菌。不發(fā)酵甘露醇。有12個(gè)血清型,其中8型又分為三個(gè)亞型。

(2)B群:又稱福氏志賀氏菌(Sh.flexneri),通稱福氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇。有15個(gè)血清型(含亞型及變種),抗原構(gòu)造復(fù)雜,有群抗原和型抗原。根據(jù)型抗原的不同,分為6型,又根據(jù)群抗原的不同將型分為亞型;X、Y變種沒有特異性抗原,僅有不同的群抗原。

(3)C群:又稱鮑氏志賀氏菌(Sh.boydii),通稱鮑氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇,有18個(gè)血清型,各型間無交叉反應(yīng)。

(4)D群:又稱宋內(nèi)氏志賀氏菌(shsonnei),通稱宋內(nèi)氏痢疾桿菌。發(fā)酵甘露醇,并遲緩發(fā)酵乳糖,一般需要3~4天。只有一個(gè)血清型。有兩個(gè)變異相,即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相為S型,Ⅱ相為R型。

抵抗力

本菌對物理化學(xué)因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱。對酸敏感,在外界環(huán)境中的抵抗力能以宋內(nèi)氏菌最強(qiáng),福氏菌次之,志賀氏菌最弱。一般56~60℃經(jīng)10分鐘即被殺死。在37℃水中存活20天,在冰塊中存活96天,蠅腸內(nèi)可存活9~10天,對化學(xué)消毒劑敏感,1%苯酚15~30分鐘死亡。

變異

1.S-R型變異:宋內(nèi)氏痢疾桿菌易為R型。當(dāng)菌落變異時(shí),常伴有生化反應(yīng)、抗原構(gòu)造和致病性的改變。

2.耐藥性變異:由于廣泛使抗生素,志賀氏菌的耐藥菌株不斷增加,給防治工作帶來多困難。

3.營養(yǎng)缺陷型變異:南斯拉夫Mel(1963年)首創(chuàng)的依賴鏈霉素的志賀氏菌株(依鏈株,Sd),作為口服菌苗可預(yù)防志賀氏菌痢疾。

致病免疫

致病性

1.侵襲力:志賀氏菌的菌毛能粘附于回腸末端和結(jié)腸粘膜的上皮細(xì)菌表面,繼而在侵襲蛋白作用下穿入上皮細(xì)胞內(nèi),一般在粘膜固有層繁殖形成感染灶。此外,凡具有K抗原的痢疾桿菌,一般致病力較強(qiáng)。

2.內(nèi)毒素:各型痢疾桿菌都具有強(qiáng)烈的內(nèi)毒素。內(nèi)毒素作用于腸壁,使其通透性增高,促進(jìn)內(nèi)毒素吸收,引起發(fā)熱,神志障礙,甚至中毒性休克綜合征等。內(nèi)毒素能破壞粘膜,形成炎癥、潰湯,出現(xiàn)典型的膿血粘液便。內(nèi)毒素還作用于腸壁植物神經(jīng)系統(tǒng),至腸功能紊亂、腸蠕動失調(diào)和痙攣,尤其直腸括約肌肌肉痙攣最為明顯,出現(xiàn)腹痛、里急后重(頻繁便意)等癥狀。

3.外毒素:志賀氏菌A群Ⅰ型及部分2型菌株還可產(chǎn)生外毒素,稱志賀氏毒素。為蛋白質(zhì),不耐熱,75~80℃1小時(shí)被破壞。該毒素具有三種生物活性:①神經(jīng)毒性,將毒素注射家兔小鼠,作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),引起四肢麻痹、死亡;②細(xì)胞毒性,對人肝細(xì)胞、猴腎細(xì)胞和HeLa細(xì)胞均有毒性;③腸毒性,具有類似大腸桿菌霍亂腸毒素的活性,可以解釋疾病早期出現(xiàn)的水樣腹瀉。

所致疾病

細(xì)菌性痢疾是最常見的腸道傳染病夏秋兩季患者最多傳染源主要為病人和帶菌者通過污染了痢疾桿菌的食物水手等經(jīng)口感染。人類對志賀氏菌易感,10~200個(gè)細(xì)菌可使10%~50%志愿者致病。一般說來,志賀氏菌所致菌痢的病情較重;宋內(nèi)氏菌引起的癥狀較輕;福氏菌介于二者之間,但排菌時(shí)間長,易轉(zhuǎn)為慢性。

1.急性細(xì)菌性痢疾:分為典型菌痢、非典型菌痢和中毒性菌痢三型。中毒性菌痢多見于小兒,各型痢疾桿菌都可引起。發(fā)病急,常在腹痛、腹瀉未出現(xiàn),呈現(xiàn)嚴(yán)重的全身中毒癥狀。

2.細(xì)菌性痢疾:急性菌痢治療不徹底,或機(jī)體抵抗力低、營養(yǎng)不良或伴有其他慢性病時(shí),易轉(zhuǎn)為慢性。病程多在二個(gè)月以上,遷延不愈或時(shí)愈時(shí)發(fā)。

部分患者可成為帶菌者,帶菌者不能從事飲食業(yè)、炊事及保育工作。

免疫性

病后免疫力不牢固,不能防止再感染。但同一流行期中再感染者較少,即具有型特異性免疫。痢疾桿菌菌型多,各型間無交叉免疫。機(jī)體對菌痢的免疫主要依靠腸道的局部免疫,即腸道粘膜細(xì)胞吞噬能力的增強(qiáng)和SIgA的作用。SIgA可阻止痢疾桿菌粘附到腸粘膜上皮細(xì)胞表面,病后三天左右即出現(xiàn),但維持時(shí)間短,由于痢疾桿菌不侵入血液,故血清型抗體(IgM,IgG)不能發(fā)揮作用。

微生物學(xué)診斷

標(biāo)本

在用藥前取糞便的膿血或粘液部分,標(biāo)本不能混有尿液。如不能及時(shí)送檢,應(yīng)將標(biāo)本保存于30%丙三醇緩沖鹽水或增菌培養(yǎng)液中。中毒性細(xì)菌性痢疾可取肛門拭子檢查。

分離培養(yǎng)與鑒定

接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基,37℃孵育18~24小時(shí),挑取無色半透明的可疑菌落,做生化反應(yīng)和血清學(xué)凝集試驗(yàn),確定菌群和菌型。如遇非典型菌株,須作系統(tǒng)生化反應(yīng)以確定菌屬;必要時(shí),用適量菌液接種于豚鼠類結(jié)膜上,觀察24小時(shí),如有炎癥,則為有毒菌株。

快速診斷法

1.熒光菌球法:適于檢查急性菌痢的糞便標(biāo)本。將標(biāo)本接種于含有熒光素標(biāo)記的志賀氏菌免疫血清液體培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)4~8小時(shí)。如標(biāo)本中有相應(yīng)型別的痢疾桿菌,繁殖后與熒光素抗體凝集成小菌球,在低倍或高倍熒光顯微鏡下易于檢出。方法簡便、快速,有一定的特異性。

2.協(xié)同凝集試驗(yàn):用志賀氏菌的IgG抗體與富含A蛋白的葡萄球菌結(jié)合,以此為試劑,測定患者糞便濾液中志賀氏菌的可溶性抗原。

防治原則

特異性預(yù)防主要采用口服減毒活菌苗,近年試用者有Sd株、2a變異株等。這些活菌苗雖有一定的預(yù)防作用,但免疫力弱,維持時(shí)間短,又服用量大、型間無保護(hù)性交叉免疫。故大規(guī)模應(yīng)用還受一定限制。治療可用磺胺類藥、氨青霉素、氯霉素等。中藥黃連、黃柏、白頭翁、馬齒莧等均有療效。

檢測最新標(biāo)準(zhǔn)

中華人民共和國衛(wèi)生部2012年5月17日最新頒部了GB4789.5-2012《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)?微生物學(xué)檢驗(yàn)?志賀氏菌》,該標(biāo)準(zhǔn)于2012年7月17日起實(shí)施。該標(biāo)準(zhǔn)已將志賀氏菌增菌條件改為:樣品25g(25ml),于225ml志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素中,于41.5℃厭氧培養(yǎng)16~20小時(shí)。該標(biāo)準(zhǔn)旨在提高志賀氏菌增菌環(huán)節(jié)的選擇性,以減少雜菌競爭抑制與干擾,提高志賀氏菌的擴(kuò)增量,最終提高志賀氏菌的檢出率。由于即將面對大量250ml三角燒瓶的厭氧培養(yǎng),常規(guī)的厭氧罐與厭氧袋均無法承擔(dān),故厭氧工作站(或稱厭氧培養(yǎng)箱)即成為該增菌操作的首選設(shè)備。

參考資料 >

食品科技網(wǎng):志賀氏菌的生物學(xué)特性.www.tech-food.com.2012-11-19

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