緩沖液是一類能抵抗外來少量強酸、強堿或稍加稀釋而保持其pH值基本不變的溶液，常用來模擬器官、組織和細胞生成的生理環(huán)境，尤其在生物學(xué)、分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)實驗中，廣泛使用緩沖液來維持研究體系的酸堿環(huán)境。緩沖溶液一般由足夠濃度的共軛酸堿對的兩種物質(zhì)按適當(dāng)比例溶解于水形成，共軛酸堿對的兩種物質(zhì)合稱為緩沖系（緩沖器 system）或緩沖對（buffer pair）。
磷酸鹽緩沖液（磷酸鹽 buffer solution，pbs），其緩沖對為磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉（NaH2PO4-Na2HPO4）或磷酸二氫鉀與磷酸氫二鉀（KH2PO4-K2HPO4）。PBS緩沖液中，由于H2PO4-能夠二級離解，所以PBS緩沖液能夠緩沖的pH值范圍很廣。正是由于PBS緩沖液能夠使溶液pH值在較大的范圍內(nèi)都保持穩(wěn)定，從而被廣泛地應(yīng)用在生物化學(xué)研究領(lǐng)域。這些溶液廣泛用于試管內(nèi)和體外研究，以及實驗室稀釋液、沖洗細胞懸浮液、清洗培養(yǎng)瓶及培養(yǎng)皿；這些溶液也常作為細胞培養(yǎng)基的添加物，商業(yè)上可用的pbs有多種不同的配方，增加鈣和鎂（+/+PBS）或者不增加（-/-PBS）。
配制方法
含0.05%吐溫20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液（簡稱為PBS－T）配制方法為：
稱取磷酸二氫鉀（KH2PO4），磷酸二氫鈉（Na2HPO4·12H2O），氯化鈉（NaCl），氯化鉀（氯化鉀），吐溫－20 ，加水。
PBS:Phosphate Buffered saline
PBS 1L配方pH7.4：磷酸氫二鉀（KH2PO4）：0.27g，
磷酸氫二鈉（Na2HPO4）：1.42g，
氯化鈉（NaCl）：8g，
氯化鉀（KCl）0.2g，
加純水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至7.4，最后定容到1L
保存方法
加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至7.4，最后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
PBS緩沖液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，氯化鉀 2.7mmol/L，Na2HPO4 10mmol/L， KH2PO4 2mmol/L
PBS緩沖液一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用，具體試劑一般也有不同的比例配方，在針對性上就有了更好的效果。
1x PBS緩沖液就是0.01M的磷酸鹽緩沖液，可直接使用。2x PBS就是2倍濃度，使用時稀釋一倍使用。0.1M的pbs一般不用來配置緩沖液，用于其它用處。
作用
PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱，不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用，蒸餾水不具有鹽平衡作用，可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性；生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用，對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng)，所以使用PBS是首選。
PBS也不是萬能的，有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。
參考資料 >