酶蛋白是指酶的純蛋白部分，是相對于輔酶因子而言，又稱為脫輔基酶蛋白，其單獨存在時不具有催化活性，與輔酶因子結(jié)合形成全酶后才顯示催化活性。酶蛋白目前主要的用與飼養(yǎng)業(yè)。酶蛋白以植物蛋白為原料，酵母菌為主菌，輔以產(chǎn)酶、產(chǎn)維生素的7種菌進行復(fù)合發(fā)酵，改善植物蛋白結(jié)構(gòu)，富含消化酶系、菌體蛋白、維生素制作的飼料。可以增強雞體抵抗力，減少死亡率。用酶蛋白部分或全部替代魚粉，蛋雞生產(chǎn)性能、體重、雞蛋品質(zhì)等與不替代差異均不顯著，還能補充酶系及有益微生物，降低試雞死亡率，經(jīng)濟效益明顯。
構(gòu)成
脫輔基酶蛋白
在由復(fù)合蛋白質(zhì)構(gòu)成的酶中，特別是能利用透析和其它方法可逆地解離其低分子成分時，稱蛋白部分為脫輔基酶蛋白，低分子部分為輔酶，具有兩者結(jié)合催化效應(yīng)的復(fù)合蛋白質(zhì)稱為全酶。即輔酶+脫輔基酶蛋白全酶。當(dāng)輔酶的結(jié)合強固時稱為輔基，例如硫胺素焦磷酸是丙酸脫羧酶（EC4．1．1．1）的輔酶，從全酶分離出后再加入到脫輔基酶蛋白中恢復(fù)其催化作用。NAD與其說是輔酶，不如說是底物。由于脫輔基酶蛋白的某個脫氫酶的作用而轉(zhuǎn)變?yōu)樗倪€原型，此還原型可由其它脫氫酶等的作用而被氧化。
輔酶
某些為催化活性所必需的，與酶蛋白疏松結(jié)合的小分子量的有機物質(zhì)。一部分酶除蛋白質(zhì)部分外，尚含有對它們的功能直接有關(guān)的一些無機化合物或有機成分，這些成分統(tǒng)稱為酶的輔因子，如果缺少這些成分，酶就顯不出活性。
輔因子包括金屬離子和一些分子量不大的有機化合物。一般常見的金屬離子有鋅離子(Zn()、鎂離子(Mg()、鐵離子(Fe()、銅離子(Cu()等，例如乙醇脫氫酶含鋅、精氨酸酶含錳、而多酚氧化酶則含銅等。
與酶蛋白結(jié)合很松弛，用透析和其它方法很易將它們與酶分開的稱為輔酶（Coenzyme）——還有激活劑與輔基之分。輔酶盡管不同于酶的底物，但在作用方式上和底物類似，在酶反應(yīng)過程中與酶結(jié)合、分離及反復(fù)循環(huán)。輔酶用量確定可將它們按底物處理。例如乳酸脫氫酶中輔酶按底物動力學(xué)方程計算。
有不少酶既含有金屬輔因子也含有輔酶。許多輔酶是或維生素的衍生物。作為輔酶的B族維生素及其衍生物20世紀(jì)前50年在維生素研究中的突出成就就是分離和鑒定了許多維生素（特別是B族維生素）并闡明了它們在人體內(nèi)的作用。發(fā)現(xiàn)不少維生素類(特別是B族維生素或其衍生物)是有機體中一些重要酶類的輔酶，它們的需要量雖不多但必須從食物中攝取。
在幾種重要的代謝反應(yīng)中起作用。在二羧酸的異構(gòu)作用中，例如在谷氨酸轉(zhuǎn)化為甲基天門冬氨酸的酶促反應(yīng)中，在乙二醇和丙三醇轉(zhuǎn)化為醛類，生物合成甲基基團以及核的合成中需要輔酶B12。根據(jù)酶催化反應(yīng)最適條件的要求，原則上在酶測定體系中應(yīng)加入一定量的輔助因子。脫輔基酶蛋白與輔基孵育一段時間后，酶活性才會恢復(fù)，因此，往往需要樣品與試劑中的輔基先預(yù)孵育的過程。輔基的用量往往較少。
輔酶盡管不同于酶的底物，但在作用方式上和底物類似，在酶反應(yīng)過程中與酶結(jié)合、分離及反復(fù)循環(huán)。輔酶用量的確定可將它們按底物處理。例如乳酸脫氫酶中輔酶按雙底物動力學(xué)方程計算。
激活劑（activator）的化學(xué)本質(zhì)是金屬離子，可以是酶的活性中心，也可以通過其他機制激活酶的活性。作為激活劑的金屬離子，其影響酶促反應(yīng)的動力學(xué)更加復(fù)雜。最常見的是二價金屬離子如Mg2+、Zn2+、Mn2+、ca(clo)2+、Fe2+等。重金屬離子大多是酶的變性劑。金屬離子之間往往存在相互拮抗或相互抑制。在酶測定體系中經(jīng)常加入乙二胺四乙酸二鈉目的是合一部分非必要的離子。合適的金屬離子濃度是必要的，過量的離子往往抑制酶反應(yīng)速度。由于激活劑的動力學(xué)往往與酶的動力學(xué)不同，這就可以解釋不同的樣品與反應(yīng)液的比例，造成酶活性測定結(jié)果的不呈比例。N-乙半胱氨酸對肌酸激酶的激活作用與此類似。激活劑的用量一般通過反復(fù)實驗來確定。
質(zhì)量測定
傳統(tǒng)測定法
酶蛋白濃度測定的方法：酶濃度嚴格來說是指酶分子的質(zhì)量濃度，常以酶蛋白濃度來表示。人體體液中的酶有幾百種，除LPS、LCAT、ChE、銅氧化酶（CER）外，大多數(shù)酶的含量在μg/L水平甚至更低。因此，酶活性濃度的測定是主要測定方法。20世紀(jì)70年代以后，隨著新技術(shù)特別是免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展，酶的定量分析技術(shù)中出現(xiàn)了許多利用酶蛋白的抗原性，通過抗原抗體反應(yīng)直接測定酶蛋白質(zhì)量的新方法。國內(nèi)外曾使用電泳法、柱層析法、免疫化學(xué)法等測定酶濃度，其中以免疫化學(xué)法應(yīng)用較廣。免疫化學(xué)法是利用酶蛋白的抗原性，制備特異性抗體后用免疫學(xué)方法測定酶濃度。用于酶濃度測定的免疫化學(xué)方法有：免疫抑制法、免疫沉淀法、放射免疫測定（RIA）、化學(xué)發(fā)光免疫測定（CLI A）、酶免疫測定（EIA）、熒光酶免疫測定（FEIA）等。其中，前兩種方法可用于酶活性濃度測定，其他方法則用于酶蛋白濃度測定。例如，如免疫抑制法測定CK-MB的活性、免疫沉淀法（單向擴散法）法測定超氧化物歧化酶（SOD）的活性；RIA測定胰蛋白酶和彈性蛋白酶濃度、CLIA測定CK-MB的濃度、ELISA測定神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）濃度等。
CK-MB是診斷急性心肌梗死、測定心肌梗死面積的重要指標(biāo)。國外對AMI診斷效率評價時多采用測定CK-MB質(zhì)量，即測定CK-MB的酶蛋白質(zhì)量濃度（質(zhì)量）的方法。CK-MB質(zhì)量的測定通常是制備抗CK-M抗體和抗CK-B抗體或采用CK-MB抗體，用CLIA、ELISA、FEIA等方法測定。這些方法適用于臨床自動化分析，具有測定時間短（最快僅需7min）、靈敏性高（最低檢測限<μg/L）和準(zhǔn)確性好的特點，明顯優(yōu)于其他分析測定CK-MB的方法，1990年后逐漸被廣泛接受。為使CK-MB質(zhì)量分析標(biāo)準(zhǔn)化，AACC成立了專門的標(biāo)準(zhǔn)化委員會，已研制成功采用重組基因技術(shù)的CK-MB參考材料（Rck-2）。
由于酶濃度測定方法的不同，報告方式也有差異：酶活性濃度單位常以U/L報告，酶質(zhì)量（mass）濃度單位常直接用ng/ml或mg/L報告。臨床醫(yī)生應(yīng)注意報告方式不同所帶來的差異。
免疫化學(xué)法
免疫化學(xué)法測定酶蛋白濃度的優(yōu)缺點與傳統(tǒng)的酶活性測定法相比，免疫化學(xué)測定法的優(yōu)點主要有：①靈敏度高，靈敏度達到ng/L至μg/L的水平，能測定樣品中用原有其他方法不易測出的少量或痕量酶；②特異性高，幾乎不受體液中其他物質(zhì)，如酶抑制劑、激活劑等的影響，不受藥物的干擾；③能用于一些不表現(xiàn)酶活性的酶蛋白的酶測定，如各種酶原或去輔基酶蛋白，或因遺傳變異而導(dǎo)致合成無活性的酶蛋白，以及失活的酶蛋白等；④在某些情況下，與酶活性測定相結(jié)合，計算免疫比活性，能提供更多的具有臨床應(yīng)用和研究價值新的資料和信息。⑤特別適用于同工酶的測定。
酶的免疫化學(xué)測定也有其局限性。主要表現(xiàn)在：①要制備足夠量的提純酶作為抗原和具有免疫化學(xué)性質(zhì)的抗血清常常是很困難的，而且工作量很大；②測定步驟多，操作繁瑣；③測定成本高。因此，必須熟練掌握免疫化學(xué)技術(shù)，掌握抗原抗體復(fù)合物形成的最佳條件，不斷降低成本，才能既保證測定結(jié)果準(zhǔn)確，又能在臨床廣泛推廣使用。
用途
醫(yī)學(xué)用途
以免疫分析為基礎(chǔ)的儀器（dca2000）在最近幾年中得到推廣酶蛋白，大約在7分鐘內(nèi)就能讀取數(shù)據(jù)，并且僅使用少量的毛細血管血液標(biāo)本，因此，在糖尿病門診，用糖化血紅蛋白評價糖尿病患者血糖控制的平均水平已成為常規(guī)。hbalc正常參考值為<6%，而在血糖控制良好的糖尿病患者應(yīng)為<7%。當(dāng)糖尿病患者的血糖控制不佳，或一天中血糖有較大的波動時，糖化血紅蛋白值就會超過7%的允許值。美國糖尿病協(xié)會建議，酶蛋白對已明確的1型糖尿病患者，每季度進行一次糖化血紅蛋白檢查。
飼養(yǎng)用途
酶蛋白以植物蛋白為原料，酵母菌為主菌，輔以產(chǎn)酶、產(chǎn)維生素的7種菌進行復(fù)合發(fā)酵，改善了植物蛋白結(jié)構(gòu)，富含消化酶系、菌體蛋白、維生素制作的飼料。通過試驗表明：雞，鴨等家禽在產(chǎn)蛋高峰期，體內(nèi)消化酶相對不足，代謝極為旺盛，對營養(yǎng)因子和致病因子均非常敏感，體質(zhì)相對虛弱，抗病力下降，消化酶活性減弱，同化作用降低(周玉吉，1992)。酶蛋白可補充消化道內(nèi)消化酶和維生素，促進了消化機能，提高了飼料利用率。酶蛋白富含芽孢桿菌、雙歧桿菌、乳酸菌、酵母菌等有益微生物。飼喂有益微生物可使腸病原菌逐漸下降。Fuller(1989)認為，直接使用有益微生物飼喂動物，可提高抗體水平或巨噬細胞活性，增強機體免疫力。故使用酶蛋白可以增強雞體抵抗力，減少死亡率。用酶蛋白部分或全部替代魚粉，蛋雞生產(chǎn)性能、體重、雞蛋品質(zhì)等與不替代差異均不顯著，還能補充酶系及有益微生物，降低試雞死亡率，1kg雞蛋的飼料成本比使用魚粉要降低10.32%～15.01%，經(jīng)濟效益明顯。
市場前景
為了順應(yīng)飼料業(yè)的產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整、提高養(yǎng)殖報酬、減少動物體內(nèi)藥殘、制造綠色飼料的大趨勢，擴大生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)品的應(yīng)用，以替代傳統(tǒng)粗加工原料和化學(xué)添加劑，已成為當(dāng)前飼料發(fā)展的新方向。
飼用酶蛋白產(chǎn)品就是其優(yōu)秀代表。生物酶制劑對提高禽畜等的產(chǎn)量和質(zhì)量有著顯著作用，如：可使家禽增重7%-10%，禽蛋增產(chǎn)5%-8%，生豬增重13%。另外，該種酶制劑還能提高牛奶、羊毛等畜產(chǎn)品的產(chǎn)量，改善皮毛質(zhì)量，更重要的是能夠節(jié)省大量的飼料。顯而易見，飼用酶蛋白應(yīng)用后的經(jīng)濟效益是非常顯著的，這種產(chǎn)品越來越受到業(yè)內(nèi)人士的關(guān)注。而且飼用酶蛋白產(chǎn)品可以多種中低價農(nóng)副產(chǎn)品作為原料，特別是油廠副產(chǎn)品：菜粕、豆粕，僅作為飼料原料出售，價格較低。而制成酶蛋白成品作為飼料蛋白源，用以替代或部分替代魚粉等高價蛋白原料，售價顯著提高，經(jīng)濟效益十分可觀。酶蛋白產(chǎn)品中內(nèi)含多種有益菌群，如改善動物消化性能、增進動物健康水平的的乳酸菌、酵母菌、雙歧桿菌等，因此更可以替代抗生素，解決了細菌抗藥性和藥殘問題，讓群眾吃上真正的放心肉。
飼用酶蛋白還含有多種酶類，如促進消化的淀粉酶、蛋白酶等、降解抗?fàn)I養(yǎng)因子的纖維素酶、植酸酶等。與使用常規(guī)飼料相比，添加1%-2%飼用酶蛋白，可以使豬日增重提高3%-6%左右，料肉比下降10%-12%，毛利潤提高10%-15%；肉雞的增重提高1%左右，粗蛋白消化率提高20%，成活率提高9.7%；蛋雞的產(chǎn)蛋率提高24.64%，料蛋率下降30.94%；魚的個體增重50%左右。從以上數(shù)據(jù)可以看出使用飼用酶蛋白，對于養(yǎng)殖戶可大大提高養(yǎng)殖報酬、對于飼料廠家則提高了飼料成品的附加值。
經(jīng)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)中國的動物飼料構(gòu)成更需要這種生物酶制劑。中國動物飼料組成中非淀粉多糖占主要成分，例如玉米11%-12%、皮33%、大豆22%、干草37%。同時飼料中還含有相當(dāng)數(shù)量的戊聚糖（玉米4%、小麥6%、大麥7.6%、黑麥8.9%），葡聚糖（小麥0.5%、大麥3.3%、黑麥1.2%）以及果膠、丹寧等。這些物質(zhì)都不能被動物消化吸收，反而因其溶于水后成為膠體狀態(tài)，還會增大腸道內(nèi)容物的粘度，阻礙營養(yǎng)物質(zhì)擴散，影響吸收利用，起到了所謂抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)即抗?fàn)I養(yǎng)因子的作用。而生物酶制劑有明顯抑制抗?fàn)I養(yǎng)因子的作用。
參考資料 >