熒光檢測(cè)是一種快速而精確的化學(xué)分析方法，它能夠檢測(cè)人體細(xì)胞、細(xì)菌、霉菌以及食物殘?jiān)任镔|(zhì)。這種檢測(cè)方法基于熒光素酶與ATP的反應(yīng)，能夠在短時(shí)間內(nèi)獲得反應(yīng)結(jié)果。熒光檢測(cè)的結(jié)果可以通過(guò)專用設(shè)備進(jìn)行測(cè)量并數(shù)字化顯示。這種方法最早應(yīng)用于食品工業(yè)，隨后在1985年擴(kuò)展至化妝品制造領(lǐng)域。
特點(diǎn)
熒光檢測(cè)具有多種顯著的特點(diǎn)，包括：
- 熒光定量：采用國(guó)際主流的熒光定量PCR技術(shù)，迅速提升技術(shù)水平。
- 結(jié)果穩(wěn)定：檢測(cè)結(jié)果CV值與進(jìn)口全自動(dòng)PCR儀接近，具有自檢功能，避免錯(cuò)誤數(shù)據(jù)的輸出。
- 封閉操作：全部檢測(cè)過(guò)程均為閉管操作，于反應(yīng)管處檢測(cè)熒光，有效防止污染，解決PCR技術(shù)中最棘手之難題。
- 準(zhǔn)確定量：滿足臨床對(duì)量化的需求，定量范圍廣，可涵蓋大部分病原菌，自動(dòng)曲線擬合。
- 靈敏度高：利用光譜信號(hào)靈敏性的優(yōu)勢(shì)，有效提高檢測(cè)靈敏度。
- 安全：全程無(wú)毒檢測(cè)。
- 操作簡(jiǎn)便：省去后處理的煩瑣過(guò)程。
- 直接打印：直接打印結(jié)果，無(wú)需記錄大量數(shù)據(jù)。
- 升級(jí)版：FS1000有與電腦連接的數(shù)據(jù)傳輸口，可以根據(jù)用戶需求提供先進(jìn)的分析軟件，全面分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。電腦和打印機(jī)為選配附件。
- 故障率低：維護(hù)非常簡(jiǎn)單。
- 節(jié)約資源：可利用現(xiàn)有PCR擴(kuò)增儀，最大限度節(jié)約資源。
缺陷
熒光檢測(cè)的一個(gè)主要局限性在于并非所有化合物都能產(chǎn)生熒光。盡管許多分子本身并不發(fā)出熒光，但它們可能包含可用于合成熒光衍生物的官能團(tuán)。例如，鄰苯二甲醛是一種常用的熒光基團(tuán)，常用于柱后衍生氨基酸。盡管熒光檢測(cè)非常靈敏，但對(duì)于常規(guī)樣品分析而言，通常不需要如此高的靈敏度。相比之下，ELSD的響應(yīng)不受熒光基團(tuán)的影響，因此不需要衍生步驟，從而顯著縮短了樣品預(yù)處理和分析時(shí)間。
應(yīng)用
熒光檢測(cè)廣泛應(yīng)用于各種科學(xué)和技術(shù)領(lǐng)域，包括但不限于：
- 流式熒光檢測(cè)：適用于大規(guī)模樣本統(tǒng)計(jì)，但無(wú)法提供空間定位信息，也無(wú)法進(jìn)行熒光定位變化的實(shí)驗(yàn)。
- 熒光顯微鏡：能夠進(jìn)行空間觀察和目標(biāo)蛋白定位，但不適合大規(guī)模檢測(cè)。
- 共聚焦熒光顯微鏡：具備良好的光學(xué)層切效果，能夠獲取三維定位信息，特別適合時(shí)間laps、FRAP和FRET等實(shí)驗(yàn)。
- 全內(nèi)反射熒光顯微鏡：專用于膜研究，無(wú)法觀測(cè)胞內(nèi)信息。
- 雙光子熒光顯微鏡：能夠進(jìn)行深層檢測(cè)，如觀察活體腦組織。
- 高內(nèi)涵藥篩系統(tǒng)：結(jié)合了流式和顯微鏡的功能，能夠自動(dòng)化完成實(shí)驗(yàn)，同時(shí)具備成像能力。
參考資料 >
熒光粉檢測(cè).豆丁網(wǎng).2024-10-24
熒光壽命測(cè)定方法ppt課件.豆丁網(wǎng).2024-10-24
熒光檢測(cè)器及檢測(cè)方法.豆丁網(wǎng).2024-10-24