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微核試驗
來源:互聯網

微核試驗是一種用于檢測染色體或有絲分裂器損傷的遺傳毒性試驗方法。這種方法主要關注那些沒有著絲粒的染色體片段或者因為紡錘體受損而丟失的整個染色體,這些染色體在細胞分裂后期會留在子細胞的胞質內形成微核。最常見的微核試驗是在嚙齒動物的骨髓嗜多染紅細胞(PCE)中進行的。通過對嚙齒類動物施加待測物質,隨后處死并取出骨髓,制作切片、固定、染色,最終在顯微鏡下計算PCE中的微核數量。如果與對照組相比,處理組PCE微核率顯著增加,并呈現出劑量-反應關系,則表明該待測物質可能是哺乳動物體細胞的致突變物。對于接觸環境致突變物的人群,可以通過人外周淋巴細胞微核試驗來進行監測和危險性評估。

發展歷史

微核試驗的歷史可以追溯到19世紀末,當時Howell與Jolly在貓和大鼠的外周血中發現了被稱為Howell-Jolly小體的小體,后來被認為是微核。1959年,Evans等人首次報告了輻射誘導MN形成的效應,并推測MN來源于染色體異常。1970年,Boiler和Schmid提出了使用骨髓嗜多染紅細胞中的MN發生率作為微核試驗基本指標的想法,并正式將其命名為MNT。在此之后,Schmid及其團隊的研究工作為MNT的理論和應用打下了堅實的基礎。

應用與方法

微核試驗作為一種直觀有效的遺傳毒性評價方法,在遺傳毒理學、醫學、食品、藥物、環境等領域有著廣泛的應用。微核計數具有經濟、快速、簡單的特點,無需特殊技能即可操作,并能夠統計更多細胞,甚至可通過計算機自動計數。微核試驗的技術種類豐富,包括常規微核試驗、細胞分裂阻滯微核分析法、熒光原位雜交試驗以及利用脫氧核糖核酸探針和抗著絲粒抗體染色等方法。

目的與意義

許多化學物質都能導致染色體異常,而染色體承載著遺傳信息,其異常可能會嚴重影響生物體的生存。輕微的突變可能導致疾病,嚴重的異常則可能導致死亡。對腫瘤細胞的研究顯示,大多數腫瘤細胞都有染色體異常。此外,先天性染色體異常會導致多種遺傳性疾病。微核試驗是檢測染色體異常的簡便方法之一,尤其是小鼠骨髓紅細胞微核檢測方法,已經發展成為一個能夠獲取大量客觀數據的化學物質遺傳毒性評價體系。

方法

微核試驗的方法主要包括動物體內細胞微核試驗,如骨髓嗜多染紅細胞微核試驗和外周血淋巴細胞微核試驗,以及細胞培養微核試驗。此外,還有蠶豆根尖微核試驗,其中使用的蠶豆品種為松滋青皮豆,經過一系列的處理步驟后,進行鏡檢以觀察微核的發生情況。

參考資料 >

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