光亮瘤蕨(學名:Phymatosorus cuspidatus),為水龍骨科瘤蕨屬下的一個植物種。分布于中國、越南、老撾、緬甸、泰國、印度、尼泊爾等地。在中國,主要分布于云南省、西藏自治區、四川省、貴州省、廣西壯族自治區、廣東省、海南省等地。生長于海拔230-1600米的林緣石灰巖石壁上。
形態特征
光亮瘤蕨是一種石上附生植物。植株高約40-100厘米。根狀莖橫走,粗約2厘米,灰綠色,疏被鱗片;鱗片卵圓形,盾狀著生,褐色,邊緣不整齊。葉遠生;葉柄長約30-50厘米,禾稈色,粗壯,無毛;葉片一回羽狀,長約30-50厘米,寬約20-25厘米;羽片約8-15對,長約15-20厘米,寬約2-3.5厘米,頂端漸尖,基部具柄(柄長達1厘米),邊緣全緣。側脈不明顯,小脈網狀。葉近革質,兩面光滑無毛。孢子囊群在羽片中脈兩側各1行,位于中脈與邊緣之間;孢子表面具很小的顆粒狀紋飾。
繁殖方法
材料
光亮瘤蕨的孢子,采集后放置于4℃冰箱保存。
培養條件
培養基以1/2MS為基本成分,分別附加0.4%的1500克/平方厘米強度卡拉膠以及不同濃度的蔗糖,調整pH在5.8-6.0,于121℃高壓滅菌鍋中滅菌15分鐘。使用人工可控氣候箱進行培養,光照度設定為3000勒克斯,每日光照時長18小時,培養溫度恒定25℃,培養濕度恒定80%。
孢子的預處理
為使孢子消毒取得更好效果,首先對孢子進行預處理,使孢子被水充分浸潤,并進一步去雜,具體預處理方法為:稱取1毫克供試孢子,置于5毫升離心管內,滴入無菌水,充分振蕩后以3000(轉/分鐘)離心1分鐘,棄去上清液,重復2次,至上清液無肉眼可見雜質后,再次充分振蕩,得到的即純度較高的孢子懸濁液,備用。
孢子的消毒
使用一次性無菌滴管吸取1毫升孢子懸濁液,滴入濾紙疊成的紙包內,置于75%的乙醇中浸泡約15s,無菌蒸餾水清洗2次,再用5%次氯酸鈉理3分鐘。浸泡消毒后,用無菌水清洗5-6次,清洗總時長不少于5分鐘,然后用滴管吸取濾紙袋內的孢子懸濁液,滴于1/2MS+10%蔗糖培養基中,輕輕搖晃,使懸浮液均勻分布于培養基上。
孢子萌發培養
將孢子懸濁液按先前得出的最適消毒方法進行處理,處理后接種于1/2MS培養基基礎成分以及1%蔗糖含量的培養基中,培養條件同上。
增殖培養
將原葉體充分分散成單個個體,挑選出其中長勢良好、大小相近的原葉體個體,接種于1/2MS+1%蔗糖培養基中進行增殖培養。在該配方下,原葉體無性增殖數量多,且原葉體個體形態較大、相互間質地疏松可分開,有利于原葉體的轉接擴增以及幼孢子體的誘導。pH區間內原葉體的增殖幾乎不受其影響。
幼孢子體誘導
根據已有文獻報道,光亮瘤蕨配子體增殖過程中會出現原葉體不斷增殖,但無法產生孢子體的現象,故采用兩種不同手段(①噴灑無菌水、振蕩培養誘導孢子體;②使用增殖培養基配方)對孢子體進行誘導,結果均無幼孢子體產生,說明滴加無菌水、振蕩培養在短期內對孢子體的誘導也沒有顯著作用。滴加無菌水、振蕩培養可以確保精子游動并進行受精作用,在此條件下光亮瘤蕨孢子體仍未發生,說明其孢子體誘導困難可能并非是培養環境沒有流動的水造成的。
使用轉接繼代法在經過11個月、7次轉接繼代后,第一株孢子體出現,說明通過不斷轉接繼代可以誘導出孢子體,此時再將原葉體轉接于1/2MS+2%蔗糖的培養基內進行邊增殖邊誘導的培養。
煉苗與移栽
當幼孢子體長至2-3厘米生長健壯時進行馴化移栽。首先在培養室半開瓶蓋放置3天,然后用鑷子從瓶內取出植株,用自來水沖洗凈附著在根部的培養基,移栽到基質中,置于光照培養箱中培養,設定培養溫度25℃,光照12小時,濕度90%。由于出瓶時孢子體已有根系長出,植株具備了完整的根、莖、葉結構,煉苗較為容易,期間注意噴水、遮蔭和保溫即可。
主要價值
在觀賞方面,其葉片寬大整齊,根狀莖粗壯如指,既可觀葉也可觀莖,又因其具有耐陰性強、相對耐旱以及養護簡單的優點,適宜于做室內大型綠植盆栽,亦可庭園景觀營造中綁扎作垂直綠化。
保護現狀
光亮瘤蕨被列入《中國生物多樣性紅色名錄-高等植物卷》(2013年9月2日)——無危(LC)。
外部鏈接
參考資料 >