甘草是甘草黃酮中重要的單體活性成分，具有抗氧化、抗HIV等多種藥理學(xué)作用。對(duì)大白鼠幽門(mén)結(jié)扎形成的潰瘍有抑制作用，對(duì)大鼠腹水肝癌及小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞能產(chǎn)生形態(tài)學(xué)上的變化。
甘草甙的簡(jiǎn)介
甘草甙，亦名甘草。甘草為豆科甘草屬植物，其根、莖是常用的中草
藥，廣泛分布于我國(guó)的東北，新疆，云南省，內(nèi)蒙古自治區(qū)，安徽省等地，《神農(nóng)本草經(jīng)》把它列為上品稱(chēng)“此草最為眾藥之王,經(jīng)方少有不用者”。甘草的成分復(fù)雜，主要含有三類(lèi)，黃類(lèi)，香豆精類(lèi)化合物，其中黃酮類(lèi)是從甘草提取物中得到的一類(lèi)生物活性較強(qiáng)的成分，其藥化學(xué)成分主要有甘草素，異甘草素，甘草甙，異甘草甙，新甘草甙等。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外都有關(guān)于甘草黃酮的清除自由基、抗氧化、抗促癌、抗致突的作用的報(bào)道。化學(xué)名稱(chēng)
成分來(lái)源
豆科光顧炳鑫Glycyrrhiza glabra L.根,甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.根。
甘草甙的提取
甘草原料的前處理
甘草原料中的化學(xué)成分十分復(fù)雜，為獲得較好的分離效果以及減少雜質(zhì)對(duì)制備色譜柱的污染，同時(shí)提高目標(biāo)物甘草甙在進(jìn)樣原料中的含量，本實(shí)驗(yàn)采取萃取方法對(duì)原料進(jìn)行前處理。用電子天平稱(chēng)取4g干草放入燒杯中，用量筒準(zhǔn)確量取100mL蒸餾水倒入燒杯中溶解，超聲15min左右，并不斷用玻璃棒攪拌，加速溶解。然后將燒杯放入90℃恒溫槽中加熱2h后熱過(guò)濾，將濾液加入正丁醇溶劑后，靜置數(shù)分鐘后，大部分的糖苷溶解于正丁醇溶劑中，接著進(jìn)行二次萃取，將殘留在水中的少量的甙類(lèi)萃取出來(lái)，最后將二次萃取得到的正丁醇溶液合并濃縮，待層析純化。
甘草甙層析純化
取10mL上述萃取后的產(chǎn)品作為備用的原料，啟動(dòng)泵，流速設(shè)置25mL/min，由流動(dòng)相（甲醇:水=1:4）將原料帶入的制備柱內(nèi)，根據(jù)出峰的情況收集干草甙產(chǎn)品的餾份：前1h的餾份作為前雜質(zhì)餾份收集在一起，然后改變流動(dòng)相比例用50%的甲醇和水的混合液沖洗柱子，每20min接一次產(chǎn)品，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮各瓶產(chǎn)品后，取20μL進(jìn)行HPLC色譜分析，直到檢測(cè)無(wú)目標(biāo)物為止。選取高效液相色譜檢測(cè)條件為：流動(dòng)相:甲醇:；固定相:硅膠碳18；色譜柱：；流速：；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm對(duì)各瓶產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，得到每20min接一次的產(chǎn)品中，第二瓶甘草甙的含量最高。
甘草甙再次層析純化
由于經(jīng)過(guò)一次層析純化后甘草甙的含量不高，所以選取同樣的方法，取10mL上述純化后的產(chǎn)品作為備用的原料流速為，由流動(dòng)相（甲醇:水=2:5）將第二瓶產(chǎn)品帶入層析柱內(nèi)，根據(jù)出峰的情況收集干草甙產(chǎn)品的餾份：每4min接一次產(chǎn)品，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮各瓶產(chǎn)品后，利用上述相同的檢測(cè)條進(jìn)行色譜分析，直到檢測(cè)無(wú)目標(biāo)物為止。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，得到每4min接一次的產(chǎn)品中，第6瓶甘草甙的含量最高，其中保留時(shí)間為5.898min為目標(biāo)峰，經(jīng)面積歸一法計(jì)算含量達(dá)到40%左右。
產(chǎn)品的后處理
將收集的產(chǎn)品在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上減壓病蒸餾，溫度為，待溶劑基本全部被蒸出后，用少量的甲醇溶解圓底燒瓶上的固體產(chǎn)品后，并倒入試管中在室溫條件下結(jié)晶，直到有白色的粒狀晶體出現(xiàn)。
參考資料 >
甘草中的一種新成分——甘草甙 - 中國(guó)知網(wǎng).中國(guó)知網(wǎng).2021-08-04