最小抑菌濃度（英文：Minimum Inhibitory Concentration，MIC）是指經過一夜的培養后，能使細菌的發育受到阻滯并被觀察到的抗細菌藥的最小濃度。MIC在診斷實驗室里是抗細菌藥對細菌的抵抗力的一個重要的指標，同時，對于驗證新的抗細菌藥的效果也是十分重要的依據。越低的MIC說明對細菌的作用越好，被普遍認為是一個對抗菌劑效用的最基本的實驗室測量指標。
基本介紹
最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration, MIC）：在特定環境下孵育24小時，可抑制某種微生物出現明顯增長的最低藥物濃度即最小抑菌濃度，用于定量測定體外抗菌活性。MIC是抗菌藥、抗病毒藥物的藥效的指標，在臨床上經常被使用到。通常要培養超過18個小時，通過肉眼觀察培養液以確認是否起效，如果溶液仍然渾濁則未達到MIC標準，若看不到渾濁則為最小抗菌藥濃度MIC。此時微生物的發育已被阻止。達到最小抑菌濃度，才能達到使細菌總數開始下降。但是，活著的細菌數目少的情況下培養液中是看不出混濁的，因此即使沒有微生物因此藥而死亡，溶液卻不變渾濁。臨床中同樣運用PK/PD參數（%T>MIC,Cmax/MIC,AUC/MIC）來評估抗菌藥的效果。
濃度測定
實驗目的
（1）掌握細菌培養技術，包括細菌的分離、培養，含菌量的測定。
（2）掌握細菌分離培養過程中的無菌操作。
（3）掌握微量肉湯二倍稀釋法測定抗菌藥物MIC的基本步驟。能準確測出各種抗菌藥物的MIC值，了解單藥的抗菌活性。
（4）為棋盤法設計棋盤做準備，求取棋盤法的中心濃度。
實驗原理
抗生素在體外體系內能夠對細菌的生長起到一定的抑制生長的作用。
實驗準備
1、菌株：標準菌株或臨床分離菌株。
2、藥物及培養基：兩種抗菌藥（注明來源及含量）、MH肉湯培養基和LB營養瓊脂等。
3、器材：96孔細胞培養板、1ml和200μL移液器、1ml和200μL槍頭、10ml刻度吸管、洗耳球、小試管、錐形瓶、容量瓶、小藥瓶加塞、試管架、平皿、接種棒、酒精燈、分析天平、自動高壓滅菌鍋、超凈工作臺和37℃恒溫箱等。
方法與步驟
1、實驗前的準備
（1）器具的清洗：將試管、平皿、錐形瓶、槍頭等實驗器具洗凈、包好，121℃、20min高壓滅菌，放烘箱烘干備用。
96孔細胞培養板（不可高壓滅菌）用洗液浸泡、超聲、沖洗干凈后，泡75%酒精備用（用前取出放超凈臺吹干，紫外殺菌2h以上）。
（2）試劑的配制：
①磷酸緩沖液（pbs）的配制。
②生理鹽水的配制：稱取0.9g NaCI于錐形瓶中，加入100ml蒸餾水，溶解。
③MH瓊脂、肉湯的配制：按照實際說明書的要求，稱取一定量LB瓊脂于錐形瓶中，加入100ml蒸餾水，溶解。按照試劑說明書的要求，稱取一定量MH肉湯粉于錐形瓶中，加入100ml蒸餾水，溶解。取瓊脂和肉湯分 裝于小試管中，每管2ml。
將配好的瓊脂、肉湯包裝好，121℃、20min高壓滅菌。待瓊脂稍冷后，在超凈臺倒平板（15～20ml瓊脂平板），凝固后置37℃恒溫培養箱過夜做無菌檢查，合格后和肉湯一起置于4℃冰箱保存備用。
（3）藥物原液的配置及保存：各種抗菌藥用蒸餾水或不同pH的pbs稀釋至所需濃度，抗生素過濾除菌，化學合成藥高壓滅菌。分裝備用。
（4）菌液的配制：挑取標準菌株或臨床分離菌株，放入MH營養肉湯，37℃培養16～24h，第二天在LB營養瓊脂平板上劃線培養16～24h，第三天挑單個菌落接種于2ml MH營養肉湯中，溫箱培養16～24h，制得供試菌液。
細菌含量測定
（1）用生理鹽水將上述菌液做10倍梯度稀釋（0.5ml菌液+4.5ml生理鹽水）。
（2）取10-5、10-6、10-7三個滴度的菌液各0.1ml滴在瓊脂平板中央，輕輕拍打，使其均勻攤開，不要接觸平皿邊緣，每個梯度做2個平板，放入37℃溫箱培養16～24h。
（3）計算菌落數：挑選長有30～300個菌落的平板來計數。兩個平板的計數結果取其平均值為細菌濃度，要求生長濁度達9×108個/ml。計算示例：10-6兩個平板上生長菌落數分別為68、70個，平均69個/0.1ml，則1ml含活菌落數690×106個/ml，即生長濁度為6.9×108個/ml。
（4）將供試菌液（3步制得）用肉湯做1：10000稀釋（最終的濁度為10）。
抑菌濃度測定
（1）在96孔培養板的前3排（即A、B、C 3排）每孔中各加入含TTC（5%）的空白肉湯100μL。
（2）在A、B、C 3排的第1孔加配好的藥液（濃度為512IU/ml或μg/ml）100μL，然后對藥物進行二倍稀釋，即第1孔中加入藥液后用移液器充分吹打（至少3次以上）使藥物與肉湯充分混勻，然后吸取100μL加入第2孔，再充分吹打使之與肉湯充分混勻，同樣吸取100/μL加入第3孔中，照此重復直至最后一孔，吸取100μL棄去；此時每孔藥物濃度從左到右依次為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125 IU/ml（或ug/ml）。
（3）再在每一孔中加入稀釋好的菌液100μL，這樣就形成測定一個藥物MIC值的3次重復（A、B、C 3排樣品）。此時每孔藥物濃度即最終藥物濃度，從左到右依次為128、64、32、16、8、4、2、1、0、0.5、0.25、0.125、0.06 IU/ml（或μg/ml）。
（4）另外在同一塊板上做一排陰性對照（僅加空白肉湯不加菌液）和一排陽性對照（加菌液肉湯不加藥液）。
（5）將96孔培養板放入37℃恒溫培養箱培養16～20h后，觀察結果。
兩種菌介紹
最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration）和最小殺菌濃度（minimum bactericidal concentration）常分別縮寫為MIC或MBC，單位以μg/ml或mg/L來表示，為最小抑制病原菌繁殖或殺滅病原微生物生存的藥物濃度，用于衡量抗感染藥（包括抗生素、抗菌藥、化學合成藥）抵抗病原微生物的能力。
使用抗感染藥治療的最終目的是根除人體被感染部位的病原微生物，從微生物學角度看是通過達到和維持一定的抗感染藥的濃度來實現的，抗感染藥在體內或體外的濃度要達到或超過MIC，才能抑制病原微生物的生長；濃度要達到或超過MBC，才能殺滅病原微生物。當然，其濃度數值越小，其抗病原微生物的活性越強。
與此相對應的有MIC50或MIC90、MBC50或MBC90，分別為抑制50%或90%病原菌繁殖或殺滅50%或90%病原微生物生存的最小濃度。
參考資料 >