苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，PAL）是催化直接脫掉L-苯丙氨酸上的氨而生成反式肉桂酸的酶。此酶的在植物體內次生物質（如木質素等）代謝中起重要作用。
簡介
L-苯丙氨酸解氨酶L－phenylalanin ammo－nialyase
縮寫PAL。是催化直接脫掉L-苯丙氨酸上的氨而生成反式桂皮酸的酶。EC．4．3．1．5。是1961年J．Koukol，E．Conn在大麥中發(fā)現的。存在于維管植物、酵母、菌類的可溶性部分。推測分子量為30萬。這是一個可把苯丙氨酸用于酚類化合物合成的酶。在很多情況下，其反應成為酚類化合物合成的有步驟的速率階段。在組織中的活性可隨外界因素而發(fā)生顯著變化，用光照，病傷害，植物激素處理等會使活性顯著增加。另外有時還受光敏色素所支配。在多數情況下，在組織中活性增加的同時，酶發(fā)生失活作用，這時組織中具有活性酶的量很快就會減少，據認為，這種失活是與類蛋白質物質作用有關。此外也已指出有非活性的酶的存在。
活性測定
原理L-苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，PAL）催化苯丙氨酸的脫氨反應，使NH3釋放出來形成反式肉桂酸。此酶的在植物體內次生物質（如木質素等）代謝中起重要作用。根據其產物，反式肉桂酸在290nm處吸光度的變化可以測定該酶的活性。材料、儀器設備及試劑（一）材料：馬鈴薯塊莖（二）儀器設備：1.?紫外分光光度計；2.?離心機；3.?研缽；4.?吸濾瓶；5.?紅光裝置；6.?打孔器。（三）試劑：1.?0.05mol/L?硼酸鹽緩沖溶液（pH8.8）；2.?0.02mol/L?L-苯丙氨酸（用0.1mol/L?pH8.8硼酸緩沖液配制）；3.?5mmol/L?2-巰基乙醇硼酸緩沖液。實驗步驟1.?馬鈴薯圓片制備 將馬鈴薯塊莖洗凈、削皮，用打孔器（直徑1.5cm）取圓柱，切除兩頭近表皮處，中間部分切成2mm厚的圓片。先用自來水漂洗，最后用蒸餾水洗一次，用紗布吸干表面的水。2.?光誘導 將圓片平鋪在濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，置20～30℃紅光下處理24h以誘導PAL（也可接種病原菌誘導等）。3.?酶粗提液的制備 經誘導處理的馬鈴薯圓片5g，加10ml含5mmol/L?的基乙醇的硼酸緩沖液、0.5g聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或PolyclarAT（除去酚類物質毒害，防止顏色的干擾、少量石英砂在研缽中研磨。勻漿抽氣過濾，濾液10，000rpm離心15min，上清液為酶粗提液。上述操作均在0～4℃下進行。4.?活性測定與計算 1ml酶液加1ml0.02mol/L?L-苯丙氨酸，2ml蒸餾水，總體積為4ml。對照不加底物，多加1ml蒸餾水；反應液置恒溫水浴30℃中保溫，0.5h后用紫外分光光度計在290nm處測定吸光度。以每小時在290nm處吸光度變化0.01所需酶量為一單位（相當每毫升反應混合物形成1μg肉桂酸）。蛋白質含量用Folin－酚法進行測定。
參考資料 >
苯丙氨酸解氨酶獲.wiki.cnki.com.cn.2017-01-18