小腸結腸炎耶爾森氏菌為革蘭氏陰性桿菌或球桿菌，大小為1-3.5×0.5-1.3μm，多單個散在，有時排列成短鏈或成堆。
詞條簡介
中文名稱 小腸結腸炎耶爾森氏菌
拉丁文名稱 屬 耶爾森菌屬
種 Y.enterocolitica
中文名稱 屬 耶爾森氏菌屬
種 小腸結腸炎耶爾森氏菌
生物學特性
本菌為革蘭氏陰性桿菌或球桿菌，大小為1-3.5×0.5-1.3μm，多單個散在，有時排列成短鏈或成堆。本菌不形成芽孢，無莢膜，有周鞭毛；但其鞭毛在30℃以下培養條件形成，溫度較高時即喪失，因此表現為30℃以下有動力，而35℃以上則無動力。
本菌生長溫度為30-37℃，但在22-29℃才能使本菌的某些特性出現。4℃時能保存和繁殖。本菌世代時間長，最短亦需40分鐘左右。在SS或麥康凱瓊脂上于25℃經24小時培養，菌落細小，至48小時直徑才增大成0.5-3.0mm。菌落圓整、光滑、濕潤、扁平或稍隆起，透明或半透明；在麥康凱瓊脂上菌落淡黃色，如若微帶紅色，則菌落中心的紅色常稍深。本菌在肉湯中生長呈均勻混濁，一般不形成菌膜。
檢測方法
設備和材料
除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外，其他設備和材料如下:
1.1 冰箱:0℃~4℃。
1.2 恒溫培養箱:26℃±1℃、36℃±1℃。
1.3 顯微鏡:10倍~100倍。
1.4 均質器。
1.5 天平：感量0.1g。
1.6 滅菌試管:16mm×160mm、15mm×100mm。
1.7 滅菌吸管:1mL (具0.01mL刻度)、10mL (具0.1mL刻度)。
1.8 錐形瓶:200mL、500mL。
1.9 滅菌平皿：直徑90mm。
1.10 微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統。
培養基和試劑
2.1 改良磷酸鹽緩沖液:
2.2 CIN-1培養基(CepulodinIrgasanNovobiocinAgar)
2.3 改良Y培養基(AgarY,Modified)
2.4 改良克氏二糖培養基。
2.5 糖發酵管
2.7 半固體瓊脂
2.8 緩沖葡萄糖蛋白水[甲基紅(MR)和V-P試驗用]。
2.9 堿處理液
2.10 尿素培養基
2.11 營養瓊脂
2.12 小腸結腸炎耶爾森氏菌診斷血清。
操作步驟
3.1 增菌
以無菌操作取25g(或25mL)樣品放入含有225mL改良磷酸鹽緩沖液增菌液的無菌均質杯或均質袋內，以8000r/min均質1min或拍擊式均質器均質1min。液體樣品或粉末狀樣品，應振蕩混勻。均質后于26℃±1℃增菌48h~72h。增菌時間長短可根據對樣品污染程度的估計來確定。
3.2 堿處理
除乳與乳制品外，其他食品的增菌液0.5mL與堿處理液4.5mL充分混合15s。
3.3 分離
將乳與乳制品增菌液或經過堿處理的其他食品增菌液分別接種于CIN-1瓊脂平板和改良Y 瓊脂平板,26℃±1℃培養48h±2h。典型菌落在CIN-1上為栗色中心，周圍具有無色透明圈(紅色牛眼狀菌落),菌落大小為1mm~2mm,在改良Y瓊脂平板上為無色透明、不黏稠的菌落。
3.4 改良克氏二糖試驗
分別挑取5.3中的可疑菌落3個~5個，分別接種于改良克氏雙糖鐵瓊脂，接種時先在斜面劃線，再于底層穿刺,26℃±1℃培養24h,將斜面和底部皆變黃且不產氣的培養物做進一步的生化鑒定。
3.5脲酶試驗和動力觀察
用接種環挑取一滿環5.4得到的可疑培養物，接種到尿素培養基中，接種量應足夠大，振搖幾秒鐘,26℃±1℃培養2h~4h。將尿素酶試驗陽性菌落分別接種于兩管半固體培養基中，于26℃±1℃和36℃±1℃培養24h。將在26℃有動力而36℃無動力的可疑菌培養物劃線接種營養瓊脂平板，進行純化培養，用純化物進行革蘭氏染色鏡檢和生化試驗。
3.6 革蘭氏染色鏡檢
將純化的可疑菌進行革蘭染色。小腸結腸炎耶爾森氏菌呈革蘭氏陰性球桿菌，有時呈橢圓或桿狀，大小為(0.8μm~3.0μm)×0.8μm
3.7 生化鑒定
3.7.1 從5.5中的營養瓊脂平板上挑取單個菌落接種生化反應管，生化反應在26℃±1℃進行。
3.7.2 如選擇微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統，可根據5.6鏡檢結果，選擇革蘭陰性球桿菌菌落作為可疑菌落，從5.5所接種的營養瓊脂平板上挑取單菌落，使用微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統進行鑒定。
3.8 血清型鑒定
除進行生化鑒定外，可選擇做血清型鑒定。在潔凈的載玻片上加一滴O 因子血清，將待試培養物混入其內，使成為均一性混濁懸液，將玻片輕輕搖動0.5min~1min,在黑色背景下觀察反應。如在2min內出現比較明顯的小顆粒狀凝集者，即為陽性反應，反之則為陰性，另用生理鹽水作對照試驗，以檢查有無自凝現象
結果與報告
綜合以上及生化特征報告結果，報告25g(或25mL)樣品中檢出或未檢出小腸結腸炎耶爾森氏菌。
流行病學特點
小腸結腸炎耶爾森氏菌分布很廣，可存在于生的蔬菜、乳和乳制品、肉類、豆制品、沙拉、牡蠣科、蛤和蝦。也存在于環境中，如湖泊、河流、土壤和植被。已從家畜、狗、貓、山羊、灰鼠、水貂和靈長目的糞便中分離出該菌。在港灣周圍，許多鳥類包括水禽和普通海鷗可能是帶菌者。
小腸結腸炎耶爾森氏菌是30年代引起注意的急性胃腸炎型食物中毒的病原菌，為人畜共患病。潛伏期約攝食后3-7天，也有報導11天才發病。病程一般為1-3天，但有些病例持續5-14天或更長。主要癥狀表現為發熱、腹痛、腹瀉、嘔吐、關節炎、敗血癥等。耶爾森菌屬病典型癥狀常為胃腸炎癥狀、發熱、亦可引起闌尾炎。有的引起反應性關節炎，另一個并發癥是敗血癥，即血液系統感染，盡管較少見，但死亡率較高。本菌對易染人群為嬰幼兒，常引起發熱、腹痛和帶血的腹瀉。
參考資料 >