甲基綠、吡羅紅為兩種堿性染料。甲基綠分子有兩個(gè)正電荷，易與雙鏈脫氧核糖核酸結(jié)合，使DNA顯示綠色，派洛寧分子有一個(gè)正電荷，易與核糖核酸結(jié)合，使RNA顯示紅色。
別名
甲基綠—派洛寧又叫unna試劑。
甲基綠與吡羅紅混合使用時(shí)，即稱為 甲基綠-派洛寧（又名：甲基綠-吡羅紅）。
配制
取A液20 mL和B液80 mL混合配成染色劑。注意：該試劑應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。
A液：配制方法一：取吡羅紅甲基綠粉1 g，加入到100 mL蒸餾水中溶解，過濾后將濾液放入褐色瓶中備用。配制方法二：取甲基綠2 g溶于98 mL蒸餾水中，取吡羅紅G 5 g溶于95 mL蒸餾水中。取6 mL甲基綠溶液和2 mL吡羅紅溶液加入到16 mL蒸餾水中，即為A液，放入棕色瓶中備用。
B液：取乙酸鈉16.4 g，用蒸餾水溶解至1 000 mL；再取乙酸12 mL，用蒸餾水稀釋至1 000 mL。取配好的乙酸鈉溶液30 mL和稀釋的乙酸20 mL，加蒸餾水50 mL，配成pH為4.8的溶液。
特異染色原理
甲基綠—派洛寧（甲基 green-pyronin）為堿性染料，它分別能與細(xì)胞內(nèi)的脫氧核糖核酸、核糖核酸結(jié)合呈現(xiàn)不同顏色。當(dāng)甲基綠與吡羅紅作為混合染料時(shí)，甲基綠與染色質(zhì)中DNA選擇性結(jié)合顯示綠色或藍(lán)色；派洛寧與核仁、細(xì)胞質(zhì)中的RNA選擇性結(jié)合顯示紅色。其原因可能是兩種染料的混合染液中有競爭作用，同時(shí)兩種核酸分子都是多聚體，而其聚合程度有所不同。甲基綠易與聚合程度高的DNA結(jié)合呈現(xiàn)綠色。而派洛寧則與聚合程度較低的RNA結(jié)合呈現(xiàn)紅色（但解聚的DNA也能和派洛寧結(jié)合呈現(xiàn)紅色）。即RNA對派洛寧親和力大，被染成紅色，而脫氧核糖核酸對甲基綠親和力大，被染成綠色。
參考資料 >