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飽和酚
來源:互聯網

飽和酚在核酸純化中有2種,一種為Tris飽和酚(pH7.8左右),故也稱為堿性酚。另一種就是酸性酚,也就是水飽和酚。

基本介紹

市售酚中含有等氧化物,這些產物可引起磷酸二鍵的斷裂及導致核糖核酸脫氧核糖核酸的交聯,應在160℃用冷凝管進行重蒸。重蒸酚加入0.1%的8-羥基啉(作為抗氧化劑),并用等體積的0.5mol/L 三羥甲基氨基甲烷·Cl (pH8.0)和0.1mol/L Tris·Cl(pH8.0)緩沖液反復抽提使之飽和并使其pH值達到7.6以上,為Tris飽和酚(pH7.8左右)。

用于RNA提取時,則要制備酸性酚,也就是水飽和酚,因為在酸性條件下,RNA被分配于水相,而DNA在有機相,從而達到分離獲得RNA的目的。水飽和酚同時能使蛋白質變性、沉淀,從核酸提取液中將蛋白質分離除去。因此,pH值不同,應用不同,切不可弄混,以免造成實驗失敗。

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