柱切換是一種在色譜分析過程中使用的常見技術。它涉及將兩個或多個色譜柱與其他組件如檢測器結合使用,以提高分析的準確性。這種技術的主要目的是防止雜質成分對色譜柱造成污染以及對分析精度和靈敏度的影響。
應用場景
柱切換技術通常用于高效液相色譜(HPLC)或氣相色譜(GC)分析體內毒物時,當遇到難以分離或未充分分離的組分與內源性雜質時。在這種情況下,直接將樣品注入色譜柱可能導致雜質不可逆地吸附在柱上,從而導致柱堵塞。因此,柱切換技術被用來先通過預處理柱(也稱為富集柱)處理樣品,使得待測組分得以進一步濃縮和純化,而雜質則留在預柱上。隨后,待測組分再進入分析柱進行分離分析。在HPLC中,柱切換通常是通過閥件來實現的,而在GC中,則可以使用壓力管柱切換來進行分析。常見的柱切換系統包括單柱正反沖洗、雙柱并聯切換和雙柱串聯切換等多種排列方式。
實例
建立了一種快速檢測大鼠血漿中普萘洛爾對映體濃度的方法,利用柱切換-高效液相色譜法。這種方法采用了自制的限制進樣填料柱作為預處理柱,通過直接進樣的方式,使普萘洛爾對映體在預處理柱上保留,同時去除血漿中的蛋白質等大分子物質。然后,通過柱切換技術,使普萘洛爾對映體在鍵合型纖維素三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Chiralcel OD-RH)分析柱上得到手性拆分。通過對實驗條件的優化,確定了切換前預處理流動相為硼酸鹽緩沖液(pH 8.5)-甲醇(95:5,v/v),流速為1.0 mL/min;切換后分析流動相為2-丙醇乙醇0.2 mmol/L硼酸鹽緩沖液(pH 8.5)(30:30:40,v/v/v),流速為0.8 mL/min;切換時間為3分鐘;柱溫為25°C;檢測波長為293 nm。普萘洛爾兩對映體在25~500 mg/L的質量濃度范圍內具有良好的線性關系(r=0.9995),三個加標水平(50、100、250 mg/L)的平均回收率分別為97.89%~101.56%,日內和日間的精密度均小于5%。該方法簡單、快速、靈敏、準確,適用于血漿樣本中手性藥物的藥代動力學研究。
參考資料 >
柱切換技術-高效液相色譜法快速檢測大鼠血漿中的普萘洛爾對映體.百度學術搜索.2024-11-26