雙縮反應是肽和蛋白質(zhì)所特有的，而為氨基酸所沒有的一種顏色反應。一般分子中含有兩個氨基甲酪基（即肽鍵：-CO-Nh）的化合物與堿性溶液作用，生成紫色或者藍紫色的配位化合物。
定義
在堿性溶液（氫氧化鈉）中，雙縮脲（H2NOC－NH－CONH2）能與銅離子（Cu2+）作用，形成紫紅色絡合物（該物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)式見圖），該反應即雙縮脲反應。
銅溶液作用，就會形成紫色或藍紫色絡合物。
注：除-CO-NH-有此反應外，（-CONH2-）、（-CH2-）、（-NH-）、（-計算機科學CS-NH2）等基團亦有此反應。
鑒定
由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此也能與銅離子在堿性溶液中發(fā)生雙縮脲反應，且顏色深淺與蛋白質(zhì)的含量的關系在一定范圍內(nèi)符合比爾定律，而與蛋白質(zhì)的氨基酸組成及分子量無關，故可用雙縮脲法測定蛋白質(zhì)的含量（借助分光光度計可減小誤差）。
雙縮脲反應主要涉及肽鍵，因此受蛋白質(zhì)特異性影響較小。且使用試劑價廉易得，操作簡便，可測定的范圍為1～10mg蛋白質(zhì)，適于精度要求不太高的蛋白質(zhì)含量的測定，能測出的蛋白質(zhì)含量須在約0.5mg以上。雙縮脲法的缺點是精確度低、所需樣品量大。干擾此測定的物質(zhì)包括在性質(zhì)上是氨基酸或肽的緩沖液，如三羥甲基氨基甲烷緩沖液，因為它們產(chǎn)生陽性呈色反應，銅離子也容易被還原，有時出現(xiàn)紅色沉淀。
注意事項
雙縮脲試劑由氫氧化鈉溶液（0.1g/mL）和CuSO4溶液（0.01g/mL）配制而成，配制比例為5：1。但是雙縮脲試劑不用現(xiàn)配現(xiàn)用，先加入NaoH營造堿性環(huán)境，再加入CuSO4。這是與斐林試劑不同的地方。
參考資料 >