氰化鉀培養(yǎng)基是一種用于微生物學(xué)實驗的培養(yǎng)基，其制備過程包括高壓滅菌和添加氰化鉀等步驟。
成分
蛋白胨：10克
氯化鈉：5克
磷酸二氫鉀：0.225克
磷酸二氫鈉：5.64克
蒸餾水：1000毫升
0.5%氰化鉀溶液：20毫升
pH值：7.6
制作方法
首先，將除了氰化鉀之外的所有成分混合均勻，并將其分裝入已消毒的玻璃容器中。隨后，在121℃的高溫下進行高壓滅菌處理，持續(xù)時間約為15分鐘。完成滅菌后，將容器置于冰箱中，以確保其徹底冷卻。接下來，向每100毫升的培養(yǎng)基中加入0.5%的氰化鉀溶液2毫升，最終得到的氰化鉀濃度為1:10000。然后，將制備好的培養(yǎng)基分裝至已經(jīng)滅菌的試管中，每個試管大約容納4毫升的液體。最后，使用滅菌過的橡膠塞密封試管，并存放在溫度為4℃的冰箱中，可以保持至少兩個月的有效期。此外，為了進行對比實驗，還需要準(zhǔn)備不含氰化鉀的對照培養(yǎng)基。
試驗方法
在使用氰化鉀培養(yǎng)基進行實驗時，需要注意安全操作。首先，將待檢測的菌株接種至蛋白胨水中，制成稀釋菌液。接著，分別從中取出一環(huán)菌液，接種至氰化鉀培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。整個過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。之后，將接種后的試管放置在恒溫箱中，設(shè)定溫度為36±1℃，并培養(yǎng)1至2天。在此期間，定期觀察培養(yǎng)基上的菌落情況。如果在氰化鉀培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落，則表示該菌株不受氰化鉀的影響，即為陽性；而在對照培養(yǎng)基上未見菌落，則表明該菌株受到氰化鉀的抑制作用，即為陰性。值得注意的是，氰化鉀具有極高的毒性，因此在操作過程中務(wù)必謹(jǐn)慎，避免接觸皮膚或吸入氣體。特別是在夏季，為了避免氰化鉀分解導(dǎo)致濃度下降，建議在低溫環(huán)境下進行培養(yǎng)基的分裝工作。
參考資料 >
氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基.青島海博生物.2024-10-31