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高效液相色譜柱是高效液相色譜系統的重要組成部分，由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等構成。其工作原理是將樣品溶液注入流動相，通過色譜柱內的分離過程，最終實現樣品的分離和檢測。
結構原理
空柱結構
高效液相色譜柱的空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。柱接頭采用低死體積結構，兩端分別為7/16英寸和3/16英寸的內螺紋，分別與相應規格的柱管和連接管配合使用。柱管兩端放置不銹鋼濾片，用于封堵柱填料。所有組件均采用316L不銹鋼材質，能夠承受常見的溶劑作用，但對于含有氯化物的溶劑需要注意防腐蝕。
柱填料
液相色譜柱的分離作用主要發生在填料與流動相之間的相互作用。柱子的分類取決于所使用的填料類型。正相柱通常使用硅膠作為柱填料，分為無定型和球型兩類，顆粒直徑范圍為3至10微米。反相柱則以硅膠為基礎，表面鍵合有十八烷基官能團（ODS），同樣分為無定型和球型。
使用要求
填充劑要求
高效液相色譜柱的填充劑種類多樣，包括化學鍵合硅膠、辛基硅烷鍵合硅膠、其他類型的硅烷鍵合硅膠、硅膠、離子交換填充劑、凝膠或多孔微球等。填充劑的性能和色譜柱的填充方式直接關系到樣品的保留行為和分離效果。分析柱的填充劑粒徑一般在3至10微米之間，特殊情況下可選擇更小或更大的粒徑。
溫度要求
以硅膠為載體的普通鍵合固定相的使用溫度不應超過35℃，特殊情況可適當提高，但不得超過60℃。
流動相要求
流動相的pH值應在2至8之間。高于8時可能使硅膠溶解，低于2時可能導致鍵合相水解脫落。使用極端pH值的流動相時，應選擇相應的耐酸或耐堿填充劑。
參考資料 >