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噬菌體抗體庫技術是一種創新的抗體庫技術,它利用噬菌體作為載體,在細菌上表達抗體片段,這些片段可以被檢測并在噬菌體顆粒表面展示。這種方法使得篩選過程更加簡單,因為不需要對細菌克隆的可溶性表達產物進行檢測。經過多次抗原吸附、洗脫和擴增步驟,能夠篩選出所需抗體克隆。篩選得到的噬菌體抗體克隆可以通過插入琥珀突變子以及使用不能閱讀琥珀突變的受體菌來獲得可溶性的Fab或scFV。
技術原理
噬菌體抗體庫技術由Burton等人開發,他們成功地將人類抗體編碼基因克隆至噬菌體中,并通過工程菌表達了具有高活性的抗體片段Fab。這些Fab片段的抗原中和能力甚至超過了天然人類抗體。這項技術采用了雙相表達載體,使基因克隆過程中的載體既可以呈現噬菌體形式,也可以呈現噬粒形式。噬菌體系統的運作模式類似于人體的B細胞系統,不同噬菌體對應著不同的抗原,其中包含編碼抗體的基因,而表達的蛋白質則位于外部。
應用前景
噬菌體抗體庫技術的發展使得單抗的人源化、小型化和多功能化成為可能。如果能建立一個容量足夠的全套抗體庫,理論上可以從其中篩選出對抗任何抗原的單克隆抗體。噬菌體抗體庫的有效表位多樣性對其實際應用至關重要。噬菌體抗體是指在噬菌體表面表達有抗體分子Fab或單鏈抗體的單鏈噬菌體,也被稱為纖絲狀噬菌體,如常見的M13。這種表面表達是通過Fab或單鏈抗體與單鏈噬菌體外殼蛋白(P或P)形成的融合蛋白來實現的。
參考資料 >
抗體噬菌體展示服務.泰克生物.2024-10-29
噬菌體展示技術.天津卡梅德.2024-10-29
先導抗體分子發現服務.華美生物.2024-10-29