微電泳法是一種利用外加電流通過含有解離物質(zhì)的微電極溶液的方法。當微電極連接正極，頭皮連接負極時，陽離子物質(zhì)會被釋放出來。微電泳過程中，解離物質(zhì)的釋放量與其通過的電荷量呈正比例關(guān)系。通常使用微電極電流來衡量解離物質(zhì)的釋放量。
器材
微電泳法使用的器材包括五管或七管微電極，這些微電極的尖端直徑約為1μm，七管總直徑在5-8μm之間。如果填充的小分子物質(zhì)如NMDA、Glu等，尖端直徑可以更小，達到0.5μm，七管總和為3-4μm，以便實現(xiàn)更高的電阻。對于大分子肽類，尖端直徑不應(yīng)超過10μm，以免泄漏。為了確保微電泳的有效性和準確性，應(yīng)結(jié)合整體功能進行分析。
充灌液
微電泳法的充灌液選擇和制備至關(guān)重要。通常使用較高濃度的NaCl（4mol）或氯化鉀（3mol）來提高電極尖端的離子濃度，從而獲得低阻抗微電極。其中一根周邊管用于平衡電流，其他管可根據(jù)需求填充不同的灌注液。常用的充灌方法包括壓力法、充灌注、真空法和乙醇法，其中玻璃纖維法最為常見。充灌液的濃度不宜過高，一般在5-500mmol/L之間，以保持良好的傳導(dǎo)性和穩(wěn)定性。對于強效化學物質(zhì)，建議使用較低濃度的NaCl作為溶劑，以避免藥物擴散引起不必要的生物學效應(yīng)。pH值的選擇應(yīng)考慮溶質(zhì)的溶解度和穩(wěn)定性，一般控制在3.5-4.0之間。無法離子化的物質(zhì)可以通過微壓力法注射。此外，為了避免藥物泄漏，可以施加一個反向的“遲滯電流”，以抵消藥物的泄漏趨勢。這種遲滯電流的大小應(yīng)根據(jù)具體情況調(diào)整，一般在10-30nA范圍內(nèi)。對于強效物質(zhì)，可能需要更大的遲滯電流。
參考資料 >
微電泳法研究變性淀粉對表面活性劑的吸附作用.百度學術(shù)搜索.2024-11-08
微電泳法研究變性淀粉對表面活性劑的吸附作用.百度學術(shù)搜索.2024-11-08
用微電泳法研究改性硅藻土的表面性質(zhì).百度學術(shù)搜索.2024-11-08